2014 Fiscal Year Annual Research Report
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24592257
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
麻生 義則 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (50345279)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻 邦和 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (20323694)
荻島 創一 東北大学, 学内共同利用施設等, 准教授 (40447496)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | サーチュイン / 軟骨代謝 / 老化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【目的】Sirt6は核に存在するNAD依存性脱アセチル化酵素、ADPリボシルトランスフェラーゼである。Sirt6-/-マウスは、加齢変化と類似した表現型を呈するが、Sirt6の骨軟骨代謝における役割は不明である。本研究の目的は、Sirt6を介する軟骨代謝のメカニズムを解明することである。
【方法】Sirt6-/-マウスと野生型マウスを免疫組織学的に評価した。生後1週の長管骨骨端部から採取された初代軟骨細胞、および軟骨細胞様細胞株ATDC5を用いてSirt6の機能評価を行った。
【結果】出生直後においてSirt6-/-マウスは、四肢長管骨が野生型よりも短縮していた。成長とともに四肢の短縮は明らかとなり、骨端部においては、二次骨化中心の成熟が遅延した。生後2週の脛骨成長板軟骨ではSirt6-/-マウスにおいて増殖層と肥大軟骨層が短縮し、増殖マーカーPCNA陽性細胞が減少した。TUNEL法では明らかな差は認められなかったが、senescenceマーカーであるPAI-1、IL-6などの発現がSirt6-/-由来軟骨にて増加していた。成長板軟骨におけるCol2a1, Col10a1およびIhhの発現がSirt6-/-マウスにおいて低下していた。ATDC5および初代軟骨細胞にてsiRNAによりSirt6をノックダウン（Sirt6KD）すると、軟骨増殖マーカー、分化マーカーが低下し, Ihhとその下流遺伝子Gli1, Patchedの発現が低下した。転写因子ATF4はIhh転写を正に制御するが、初代軟骨細胞を用いたChIP assayの結果、Ihhプロモーターに対するATF4結合はSirt6KDによって抑制された。
【結論】Sirt6は少なくとも部分的にIhh発現制御を介して軟骨細胞の分化、増殖を促進すること、軟骨細胞のsenescenceを抑制することを明らかにした。
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Research Products
(5 results)
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[Journal Article] Mitochondrial superoxide in osteocytes perturbs canalicular networks in the setting of age-related osteoporosis.2015
Author(s)
Kobayashi K1, Nojiri H2, Saita Y2, Morikawa D1, Ozawa Y3, Watanabe K3, Koike M1, Asou Y4, Shirasawa T5, Yokote K6, Kaneko K2, Shimizu T3.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: Mar 16;5
Pages: 9148
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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