2014 Fiscal Year Annual Research Report
テトラビオプテリンの代謝経路とコリン作動性阻害剤の鎮痛機序
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24592334
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
J・P Bellier 滋賀医科大学, 分子神経科学研究センタ-, 助教 (80346022)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 維光 滋賀医科大学, 医学部, 助教 (80242973)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | テトラヒドロビオプテリン / アセチルコリン / GTP cyclohydrolase 1 / Dorsal root ganglion / Brain Stem / 痛覚伝達 / 後根神経節 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
グアニル酸シクロヒドロラーゼ1（GTP cyclohydrolase 1; GCH1）はテトラヒドロビオプテリン（BH4）生成経路の律速酵素である。痛覚伝達経路においてGCH1が重要な役割を果たしている。
これまでの研究により、GCH１の酵素活性はGFRP（GCH1 feedback regulatory protein）という調節因子によって修飾されることが示唆された。一方GCH１の酵素活性の調節においてはGCH1 /GFRP の複合体の形成が必要である。GCH1/GFRP複合体の形成を明らかにするために本研究はin vitroでGCH1/GFRP複合体の形成を調べた。
正常細胞株及びGFRP発現細胞を用いて種々の薬剤の効果を調べた。高速液体クロマトグラフィー法でBH4およびほかのビオプテリンを測定した。また、blue-native電気泳動法によりGCH1 /GFRP 複合体の形成を観察した。BH4レベルの変化を確認したが、しかし、GCH1/GFRP 複合体形成に有意な変化は認められない。これらの実験結果により、BH4 レベルの変化においてde novo BH4合成経路 (GCH1酵素経路)だけではなく、ほかの代謝パスウェイ系が関与している可能性がある。GCH1 /GFRP 複合体の形成をさらに調べるために、新たな抗体を作製する。まず抗体の特異性を確認するためにGRFPおよびGCH1の発現細胞株を使用した。また脳の全体組織を視覚化（透明化）する新しい方法を確立した。
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