ｉＴＲＡＱ法による子宮体癌化学療法抵抗性に関わる蛋白質の同定とメカニズムの解析

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24592516
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 上田 豊 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10346215)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小林 栄仁 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50614773) ; 藤田 征巳 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (60303963) ; 榎本 隆之 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 招へい教員 (90283754) ; 吉野 潔 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90362730) ; 木村 敏啓 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 招へい教員 (90584524)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 婦人科腫瘍 / 子宮体癌 / 化学療法 / 抵抗性 / 蛋白質発現

Outline of Annual Research Achievements

化学療法（TEC療法）が奏効した進行・再発子宮体癌組織および化学療法に抵抗性であった進行・再発子宮体癌において特異的に発現が増強または減弱している蛋白質を2種同定したが、そのうちAnnexin A4（Anx A4）については機能解析まで進展した。

Anx A4が弱陽性である子宮内膜癌細胞HEC1を用い、Anx A4 cDNAを遺伝子導入し、安定発現株 HEC1-A4 株を樹立した。Anx A4の安定発現により、CisplatinのIC50は有意に上昇し、in vivo における Cisplatin 投与では有意に腫瘍増殖抑制率が低下した。Cisplatin暴露後の細胞内 Pt 濃度はコントロール株に比しHEC1-A4 株では有意に低下し、Pt 排出の促進がPt 耐性の原因と考えられた。また、Cisplatin暴露後 Anx A4とATP7A は共に細胞質から細胞膜へと局在を変え、共局在しており、HEC1-A4 株のCisplatin IC50はATP7Aのノックダウンによりコントロール株と同等の感受性にまで改善した。これらの結果よりCisplatin 投与によりAnx A4 は ATP7Aと細胞膜で共局在して、Pt 排出の促進に関与することが明らかとなった（Int J Cancer. 2014;134:1796-809、Expert Opin Ther Targets. 2014;18:403-14）。

さらに、ANXA4のdeletion mutant安定発現株では、Cisplatin 投与によりIC50は有意に上昇したが、N末端側のannexin repeat を1個だけ有する株のCa2+結合部位が機能しなくなるpoint mutationを導入した株では薬剤耐性が誘導されなかった。これらのことから、ANXA4のプラチナ耐性には少なくともN末端側のCa2+結合部位が関与することが示された（Oncotarget. 2014;5:7776-87）。

Research Products

• [Journal Article] Annexin A4-conferred platinum resistance is mediated by the copper transporter ATP7A (2014)
  • Author(s): Matsuzaki, S. Enomoto, T. Serada, S. Yoshino, K. Nagamori, S. Morimoto, A. Yokoyama, T. Kim A. Kimura, T. Ueda, Y. Fujita, M. Fujimoto, M. Kanai, Y. Kimura, T. Naka, T.
  • Journal Title: Int J Cancer Volume: 134(8) Pages: 1796-809
  • DOI: 10.1002/ijc.28526
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Annexin A4 is a promising therapeutic target for the treatment of platinum-resistant cancers (2014)
  • Author(s): Matsuzaki, S. Serada, S. Morimoto, A. Ueda, Y. Yoshino, K. Kimura, T. Naka, T.
  • Journal Title: Expert Opin Ther Tar Volume: 18(4) Pages: 403-14
  • DOI: 10.1517/14728222.2014.882323
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Annexin A4 induces platinum resistance in a chloride-and calcium-dependent manner (2014)
  • Author(s): Morimoto, A. Serada, S. Enomoto, T. Kim, A. Matsuzaki, S. Takahashi, T. Ueda, Y. Yoshino, K. Fujita, M. Fujimoto, M. Kimura, T. Naka, T.
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 5(17) Pages: 7776-87
  • Peer Reviewed
• [Presentation] プラチナ耐性因子である Annexin A4 はプラチナ耐性癌の治療ターゲットとなりうる (2015)
  • Author(s): 松崎慎哉 角田守 松崎聖子 久保田哲 中川慧 清原裕美子 平松宏祐 森本晶子 高田友美 小林栄仁 上田豊 吉野潔 木村正
  • Organizer: 第3回婦人科がんバイオマーカー研究会学術集会
  • Place of Presentation: 福岡
  • Year and Date: 2015-02-21 – 2015-02-21
• [Presentation] タキサン・プラチナ抵抗子宮体癌に対するGLIF療法の有効性と有害事象の検討 (2014)
  • Author(s): 中川慧 上田豊 平松宏祐 清原裕美子 森本晶子 松崎慎哉 高田友美 小林栄仁 木村敏啓 磯部晶 馬淵誠士 澤田健二郎 吉野潔 藤田征巳 筒井建紀 木村正
  • Organizer: 第56回日本婦人科腫瘍学会学術講演会
  • Place of Presentation: 栃木
  • Year and Date: 2014-07-17 – 2014-07-19
• [Presentation] プラチナ抵抗性の再発子宮体癌に対してGLIF療法が著効した1例 (2014)
  • Author(s): 中川慧 上田豊 木村敏啓 小林栄仁 磯部晶 馬淵誠士 澤田健二郎 吉野潔 藤田征巳 筒井建紀 木村正
  • Organizer: 第130回近畿産科婦人科学会学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [Presentation] Annexin A4の発現は細胞内クロールイオン濃度を上昇させ、プラチナ耐性を誘導している (2014)
  • Author(s): 森本晶子 松崎慎哉 小林栄仁 木村敏啓 上田豊 吉野潔 藤田征巳 榎本隆之 仲哲治 木村正
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20
• [Presentation] IMP-2 は子宮内膜癌におけるパクリタキセル耐性に関与している (2014)
  • Author(s): 松崎慎哉 森本晶子 中川慧 平松宏祐 木村敏啓 小林栄仁 上田豊 吉野潔 藤田征巳 仲哲治 木村正
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20
• [Presentation] 網羅的タンパク解析およびバイオインフォマティクスを用いた類内膜癌発生臓器の鑑別マーカーの探索 (2014)
  • Author(s): 平松宏祐 吉野潔 高田友美 松崎慎哉 木村敏啓 小林栄仁 上田豊 藤田征巳 仲哲治 木村正
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20