2014 Fiscal Year Annual Research Report
Ｇ２ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ａｂｒｏｇａｔｉｏｎによる頭頸部癌抗癌剤耐性の克服
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24592591
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| Research Institution | University of Fukui |
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Principal Investigator |
成田 憲彦 福井大学, 医学部附属病院, 講師 (80345678)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松本 英樹 福井大学, 高エネルギー医学研究センター, 准教授 (40142377)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | PCBP4 / head and neck cancer / cisplatin / resistance / G2 checkpoint abrogation |
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| Outline of Annual Research Achievements |
頭頸部癌（上顎癌）細胞株IMC3からシスプラチン高度耐性株IMC3CRを樹立した。フローサイトメトリーの結果、IMC3CRをシスプラチン処理すると、野生株に比べて優位にG2/M arrestが誘導されアポトーシスが回避されている可能性が示された。またPCR arrayの結果から、IMC3CRにシスプラチンを添加した際に、POLY(rC)-BINDING PROTEIN 4(PCBP4)の発現が２倍以上に増加する事を見出した。PCBP4は複数種の癌においてG2/M arrestを誘導するとの過去の報告から、この分子の高発現がIMC3CRにおいてシスプラチン処理後、G2/M arrestとその間のDNA修復を誘導し、アポトーシス回避に寄与すると考えた。PCBP4の機能解析のためRNAiによりPCBP4を抑制し、MTT assayを施行した。その結果、PCBP4を抑制することで、シスプラチン処理後のIMC3CRの細胞生存率は約１／２に著明に減少することが解った。次にPCBP4を強制発現するベクターを作成し、野生株IMC3にトランスフェスフェクションした。得られたPCBP4強発現株において、MTT assayを行うと、強制発現株はIMC3CRと同程度のシスプラチン耐性を獲得していることが明らかになった。またRIP assayの結果からPCBP4はCdc25AのmRNAに結合し、その発現を抑制することでG2/M arrestを誘導することが明らかになった。このことからPCBP4は頭頸部癌シスプラチン耐性において重要な働きをしており、この分子を抑制することでシスプラチン耐性頭頸部癌に対する分子標的治療に発展できると考える。
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