胆道閉鎖症における制御性Ｔ細胞の機能解析

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24592692
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 齋藤 武 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (20406044)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 幡野 雅彦 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20208523) ; 吉田 英生 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60210712) ; 光永 哲也 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (80375774) ; 坂本 明美 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90359597) ; 中田 光政 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (90375775)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 制御性T細胞 / 胆道閉鎖症 / サイトカイン / 炎症制御 / 免疫学

Outline of Annual Research Achievements

平成26年度は、胆道閉鎖症(BA)における全身・局所免疫環境におけるTh17細胞とTreg細胞の相互関係を検証し、Tregの機能を解析した。
1. BA16例の術前血清を用いflow cytometryにてIL-17AとIL-10濃度を測定し、正常ｺﾝﾄﾛｰﾙ群(NC)13例・胆汁鬱滞性ｺﾝﾄﾛｰﾙ群(CC)15例と比較した。BA, NC, CC群の順に、IL-17A検出例は 1・1・2検体、IL-10は2・1・3検体であり、病態形成期に両者の免疫学的作用が全身に及ぶ可能性は否定的であった。2. BAとnonBA各10例の肝内IL-17A, TGFbeta, FoxP3のmRNAﾚﾍﾞﾙをPCR法で測定した。両群ともIL-17Aはほぼ検出されず、TGFbetaとFoxP3はBAで有意に高値であった。3. FACSにて末血CD4+Tﾘﾝﾊﾟ球中に占めるCD4+CD25+FoxP3+細胞(Treg)のpopulationを測定した。BA(日齢32)は3.3%、肝芽腫3ヵ月児8.5%、10歳潰瘍性大腸炎2.5%であった。4. CFSE suppression assayにて、Tregの増殖抑制能を調べた。1 well中にｴﾌｪｸﾀｰ細胞を撒布しTregを添加、増殖刺激下に3日間培養した。特定のCFSE減衰(4回分裂)を示したｴﾌｪｸﾀｰ細胞の割合(M4,%)を計測した。ｺﾝﾄﾛｰﾙ(卵巣嚢腫日齢6)ではM4は23%でTreg添加で9%に抑制された。BA I cyst胎児診断例(日齢4)はM4が29%、Treg添加で32%であったが(tripletのmean, p=0.02)、3倍量のTregを加えると20％に抑制された。
以上より、BAの全身・局所免疫環境下ではTh17/Tregバランスの不均衡は明らかでなかった。一方全身から肝にTregが動員され、I cyst新生児例でTregの機能低下が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Evidence for Viral Infection as a Causative Factor of Human Biliary Atresia (2015)
  • Author(s): Takeshi Saito, Keita Terui, Tetsuya Mitsunaga, Mitsuyuki Nakata, Sachie Ono, Naoko Mise, and Hideo Yoshida
  • Journal Title: J Pediatr Surg Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Role of Pediatric ERCP in an Era Stressing Less-invasive Imaging Modalities. (2014)
  • Author(s): Saito T, Terui K, Mitsunaga T, Nakata M, Kuriyama Y, Higashimoto Y, Onuma N, Takahashi H, Yoshida H.
  • Journal Title: J Pediatr Gastroenterol Nutr. Volume: 59 Pages: 204-209
  • DOI: 10.1097/MPG.0000000000000399
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 膵・胆管合流異常の診断の最前線 ERCP (2014)
  • Author(s): 齋藤 武, 照井慶太, 光永哲也, 中田光政, 大野幸恵, 三瀬直子, 笈田 諭, 吉田英生
  • Journal Title: 胆と膵 Volume: 35 Pages: 883-887
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 直腸・粘膜脱に対する再手術． (2014)
  • Author(s): 中田光政, 岩井 潤, 東本恭幸, 菱木知郎, 齋藤 武, 照井慶太, 光永哲也, 大野幸恵, 小林真史, 三瀬直子, 小原由紀子, 秦 佳孝, 笈田 諭, 吉田英生．
  • Journal Title: 小児外科 Volume: 46 Pages: 35-38
• [Journal Article] 上腸間膜動脈症候群． (2014)
  • Author(s): 中田光政, 齋藤 武, 照井慶太, 光永哲也, 大野幸恵, 三瀬直子, 小原由紀子, 柴田涼平, 原田知明, 笈田 諭, 勝俣善夫, 川口雄之亮, 吉澤比呂子, 吉田英生．
  • Journal Title: 小児外科 Volume: 46 Pages: 818-822
• [Presentation] Management Strategy for Intrahepatic Calculi after Radical Surgery for Pediatric Choledochal Cyst. (2015)
  • Author(s): Takeshi Saito, Keita Terui, Tetsuya Mitsunaga, Mitsuyuki Nakata and Hideo Yoshida.
  • Organizer: 62nd Annual Meeting of the British Association of Pediatric Surgeons.
  • Place of Presentation: Cardiff, Wales, United Kingdom
  • Year and Date: 2015-07-21 – 2015-07-24
• [Presentation] 当科の胆道閉鎖症(Biliary Atresia; BA)疑い症例に対する診断アプローチの考察 (2015)
  • Author(s): 齋藤 武、照井慶太、光永哲也、中田光政、大野幸恵、三瀬直子、笈田 諭、吉田英生
  • Organizer: 第52回日本小児外科学会学術集会.
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場(兵庫県・神戸市)
  • Year and Date: 2015-05-28 – 2015-05-30
• [Presentation] 胆道閉鎖症におけるTh17/TregバランスとTregの意義 (2015)
  • Author(s): 齋藤 武、小原由紀子、坂本明美、照井慶太、光永哲也、中田光政、大野幸恵、三瀬直子、幡野雅彦、吉田英生
  • Organizer: 第52回日本小児外科学会学術集会.
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場(兵庫県・神戸市)
  • Year and Date: 2015-05-28 – 2015-05-30
• [Presentation] 当科の胆道閉鎖症(Biliary Atresia; BA)疑い症例に対する診断アプローチとその成績 (2014)
  • Author(s): 齋藤 武、照井慶太、光永哲也、中田光政、大野幸恵、三瀬直子、笈田 諭、川口雄之亮、吉澤比呂子、吉田英生
  • Organizer: 第41回日本胆道閉鎖症研究会．
  • Place of Presentation: 熊本市医師会館(熊本県・熊本市)
  • Year and Date: 2014-11-15 – 2014-11-15
• [Presentation] Systemic and Local Cytokine Profile in Biliary Atresia. (2014)
  • Author(s): Saito T., Sakamoto A., Terui K., Mitsunaga T., Nakata M., Ono S., Hatano M., Higashimoto Y., Iwai J., Yoshida H,.
  • Organizer: Biliary Atresia and Related Diseases
  • Place of Presentation: Langenbeck-Virchow-Haus, Berlin, Germany.
  • Year and Date: 2014-10-16 – 2014-10-17
• [Presentation] 膵・胆管合流異常(PBM)小児例に対する術前・術中画像検査の意義． (2014)
  • Author(s): 齋藤 武, 照井慶太, 光永哲也, 中田光政, 大野幸恵, 三瀬直子, 笈田 諭, 吉田英生．
  • Organizer: 第37回日本膵・胆管合流異常研究会.
  • Place of Presentation: 横浜シンポジア(神奈川県・横浜市)
  • Year and Date: 2014-09-13 – 2014-09-13
• [Presentation] Systemic and local cytokine profile in biliary atresia. (2014)
  • Author(s): Takeshi Saito, Keita Terui, Tetsuya Mitsunaga, Mitsuyuki Nakata and Hideo Yoshida.
  • Organizer: 47th Annual Meeting of the Pacific Association of Pediatric Surgeons.
  • Place of Presentation: Banff, Alberta, Canada.
  • Year and Date: 2014-05-25 – 2014-05-29
• [Presentation] The significance of imaging modalities in surgery for pediatric choledochal cyst. (2014)
  • Author(s): Takeshi Saito, Keita Terui, Tetsuya Mitsunaga, Mitsuyuki Nakata and Hideo Yoshida.
  • Organizer: 47th Annual Meeting of the Pacific Association of Pediatric Surgeons.
  • Place of Presentation: Banff, Alberta, Canada.
  • Year and Date: 2014-05-25 – 2014-05-29
• [Presentation] 胆道閉鎖症（Biliary Atresia; BA）における細胞性免疫環境の探索． (2014)
  • Author(s): 齋藤 武，坂本明美，照井慶太，光永哲也，中田光政，大野幸恵，小林真史，笈田 諭，東本恭幸，岩井 潤，吉田英生．
  • Organizer: 第51回日本小児外科学会学術集会.
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪府・大阪市)
  • Year and Date: 2014-05-08 – 2014-05-10
• [Presentation] 膵・胆管合流異常（PBM）に対する術前・術中各種画像検査の意義． (2014)
  • Author(s): 齋藤 武，照井慶太，光永哲也，中田光政，大野幸恵，小林真史，笈田 諭，吉田英生．
  • Organizer: 第51回日本小児外科学会学術集会.
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪府・大阪市)
  • Year and Date: 2014-05-08 – 2014-05-10