2014 Fiscal Year Research-status Report
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24592779
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| Research Institution | Tokyo Dental College |
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Principal Investigator |
澤田 隆 東京歯科大学, 歯学部, 准教授 (60125010)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柴山 和子 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (60408317)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 接合上皮 / 内側基底板 / ラミニン５ / アメロチン / 免疫電顕 / ニホンザル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯肉接合上皮―エナメル質界面の微細構造、化学組成、および接着能を明らかにするために透過電子顕微鏡解析、免疫組織細胞化学解析、in situ hybridization解析による研究を施行している。本年度は、材料に日本ザルの歯肉を用いて実験を行った。その結果、サル歯肉では界面に電子密度の高い内側基底板がエナメル質と接合上皮の間に介在し、歯冠側に向かってその厚みを増した。歯冠側には電子密度が内側基底板と同程度で、無構造状の歯小皮がエナメル質側にしばしば出現した。ラミニン５抗体による金コロイド標識免疫電顕観察の結果、内側基底板に沿って金コロイドが沈着し、その分布密度は歯冠側に向かい増加していることが明らかとなった。歯小皮にもラミニン５の沈着が確認された。
次に、接合上皮内側基底板の発生に関して、サル歯胚を用いて成熟期エナメル芽細胞―エナメル質界面を上記と同じ免疫電顕法により解析を行った。その結果、エナメル芽細胞―エナメル質界面には基底膜様構造がみられ、これはlamina lucidaとlamina densa、およびエナメル質側の第３層なわちlamina fibroreticularisで構成されていることが確認できた。ラミニン５はこのうちlamina densaに特異的に局在した。一方、lamina fibroreticularisにはラミニン５は局在せず、その代わりにアメロチンが局在していることが明らかとなった。アメロチンは石灰化促進機能があると考えられていることから、今回の結果は、アメロチンが成熟期エナメル芽細胞の基底膜様構造の第３層であるlamina fibroreticularis の石灰化を促し、これによりエナメル質表層との接着を強固にすることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
１．歯肉接合上皮―エナメル質界面の微細構造と化学組成について、透過電子顕微鏡と金コロイド標識免疫電顕によるラミニン５の超微局在をサル歯肉を用いて検索した。その結果、「研究実績の概要」に記載の通りの研究成果を挙げることができた。成果の一部は、MEDICAL MOLECULAR MORPHOLOGY に掲載された。
２．成熟期エナメル芽細胞―エナメル質界面の免疫電顕解析については、おおむね満足できる結果が得られているので、現在論文作成中である。
３．ブタ歯肉３次元培養については、前年度の失敗を踏まえて再度試みたが、残念ながら培養ゲルにコンタミが生じ成果を挙げることができなかった。現在対策等を検討中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
１．歯の萌出に伴う接合上皮の発生と、内側基底板の形成過程、および基底板とエナメル質との接着機構について解析を継続する。
２．上記、執筆中の論文についてできるだけ早く完成させ投稿し、掲載されるよう努める。
３．ブタ材料についての３次元培養は、コンタミネーッションの原因が不明なため、これを続行するか否か、研究協力者と相談し決定する。その場合、すでに確立されている、ヒト歯肉３次元培養による解析系を応用することも視野に入れて検討する。
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| Causes of Carryover |
H26年度研究費で、物品費として見込んでいた試薬のうち、ブタ歯肉による培養実験系に遅延が生じたため、これに使用する薬品等の調達を保留した。研究成果の学会発表（国内、国外）を本年度は行わなかったので、これに要する予算は執行しなかった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
１．抗体等の試薬類の購入、追加用の実験動物の購入
２．成果発表のための旅費、論文作成費、および論文印刷費
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Research Products
(1 results)
