Ｇｏｒｌｉｎ症候群由来細胞を用いたヘッジホッグ情報伝達系の解析

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24592854
• Research Institution: Hyogo Medical University
• Principal Investigator: 中野 芳朗 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (30360267)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 玉置 知子(橋本知子) 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (10172868) ; 岸本 裕充 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (30291818) ; 野口 一馬 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (50309473)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: Gorlin症候群 / ヘッジホッグ / PTCH1 / 角化嚢胞性歯原性腫瘍 / 分化

Outline of Annual Research Achievements

１）Gorlin症候群患者由来の皮膚線維芽細胞 (PTCH1+/－)と正常人由来皮膚線維芽細胞(PTCH1+/+)とのDNA damage後の反応性の違いを解析する事を目的として、DNA damage処理20時間後におけるDNA damage関連蛋白の変化を調べたが、その反応性に大きな差は認められなかった。また今回分離株化した角化嚢胞性歯原性腫瘍（KCOT）由来のKCOT2細胞（遺伝型はPTCH1－/－）NS11細胞（遺伝型はPTCH1＋/－）でも同様の反応性を調べたが大きな差は見つけられなかった。
２）腫瘍化に伴いその存在・形態の変化が報告されているヘッジホッグ伝達系の場として知られるprimary ciliaは、Gorlin症候群患者由来の皮膚線維芽細胞 、正常人由来皮膚線維芽細胞、Gorlin症候群患者及び弧発性のKCOTから樹立したKCOTの細胞株いずれにも存在する事が確認できたが、SMO、PTCH1、GLIファミリーのciliaにおける動態は抗体がよく働かなく検証できなかった。現在GFPを付けたSMO、PTCH1、GLIを細胞に導入することにより検定を行っている。
３）我々がGorlin症候群患者及び弧発性のKCOTから樹立したKCOTの細胞株（NS11、KCOT2）の詳細な解析を行った。これらの細胞系はカルシウム濃度を上げる事により形態の変化（錯角化及びnodule形成）を示すが、この変化に伴いE-cadherin、N-cadherin、vimentin、β-catenin、Snail、Slug、Bmi1などepithelial-mesenchymal transition時に変化する蛋白の変動が見られた。 またこれら細胞では、幹細胞のマーカーとして知られるCD44、SOX2の発現が両細胞で確認され、カルシウム濃度を変化させると同様に変化する事も判明した。

Research Products

• [Journal Article] The Hippo pathway transcriptional co-activator, YAP, confers resistance to cisplatin in human oral squamous cell carcinoma. (2015)
  • Author(s): Yoshikawa K, Noguchi K, Nakano Y, Yamamura M, Takaoka K, Hashimoto-Tamaoki T, Kishimoto H.
  • Journal Title: Int J Oncol Volume: 46 Pages: 2364-2370
  • DOI: 10.3892/ijo.2015.2948.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Biallelic germline and somatic mutations in malignant mesothelioma: multiple mutations in transcription regulators including mSWI/SNF genes. (2015)
  • Author(s): Yoshikawa Y, Sato A, Tsujimura T, Otsuki T, Fukuoka K, Hasegawa S, Nakano T, Hashimoto-Tamaoki T.
  • Journal Title: Int J Cancer Volume: 136 Pages: 560-571
  • DOI: 10.1002/ijc.29015.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] チーム医療による口腔癌治療 (2014)
  • Author(s): 野口 一馬
  • Journal Title: 兵庫医科大学医学会雑誌 Volume: 39 Pages: 53-58
• [Presentation] Hedgehog signaling and human disease (2014)
  • Author(s): Nakano Yoshiro, Noguchi Kazuma, Chiyo Hideaki, Pooh Ritsuko, Kishimoto Hiromitu, Tamaoki tomoko.
  • Organizer: The 37th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan
  • Place of Presentation: Yokohama
  • Year and Date: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [Presentation] シスプラチン耐性口腔扁平上皮癌におけるHippo pathwayの関与の検討 (2014)
  • Author(s): 吉川 恭平，野口 一馬，山村 倫世，頭司 雄介，高岡 一樹，岸本 裕充
  • Organizer: 第51回日本口腔組織培養学会学術大会・総会
  • Place of Presentation: 小倉
  • Year and Date: 2014-11-15
• [Presentation] 口腔癌におけるTNM分類のための画像診断と外科的切除の実際 (2014)
  • Author(s): 野口 一馬，石蔵 礼一
  • Organizer: 第50回日本医学放射線学会秋季臨床大会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 2014-09-26
• [Presentation] 次世代シークエンサーの地域医療教育への導入 (2014)
  • Author(s): 中野 芳朗, 玉置 知子[橋本], 久保 秀司, 吉川 良恵, 振津 かつみ, 若林 一郎, 今西 宏安, 高橋 敬子, 成瀬 均, 鈴木 敬一郎
  • Organizer: 第46回日本医学教育学会大会
  • Place of Presentation: 和歌山
  • Year and Date: 2014-07-18 – 2014-07-19
• [Presentation] 臨床遺伝学分野での臨床実習 遺伝カウンセリング、次世代シークエンサー解析の導入 (2014)
  • Author(s): 玉置 知子[橋本], 覚道 真理子, 佐藤 智佳, 振津 かつみ, 吉川 良恵, 久保 秀司, 中野 芳朗, 高橋 敬子, 成瀬 均, 鈴木 敬一郎
  • Organizer: 第46回日本医学教育学会大会
  • Place of Presentation: 和歌山
  • Year and Date: 2014-07-18 – 2014-07-19
• [Presentation] Greig症候群の家系例 (2014)
  • Author(s): 玉置 知子[橋本], 千代 豪昭, 夫 律子, 岸本 裕充, 覚道 真理子, 佐藤 智佳, 井上 佳代, 振津 かつみ, 三村 博子, 中野 芳朗
  • Organizer: 第38回日本遺伝カウンセリング学会学術集会
  • Place of Presentation: 東大阪
  • Year and Date: 2014-06-27
• [Remarks] 兵庫医科大学
  • URL: http://www.hyo-med.ac.jp