2014 Fiscal Year Annual Research Report
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24650200
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
森 望 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (00130394)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 老化 / 神経細胞 / 細胞培養 / ニューロン / 寿命遺伝子 / 神経変性 / 蛋白質凝集 / 寿命 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、ラット脳の海馬からの初代培養神経細胞をシャーレ上にて長期培養し、インビトロでのニューロンの老化様態を観察するとともに、その老化の制御因子、神経細胞寿命の規定因子を把握することを目的として研究を進めた。これまでに確立した培養条件で、恒常的に５－６ヶ月の長期培養には成功しているが、１年を越えての生存率は激減した。その問題点はあるにせよ、培養１ヶ月齢（ほぼ４週齢）のニューロンと培養４－５ヶ月のニューロンとでは老若の比較研究ができるようになった。４－５ヶ月の培養ニューロンではリポフスチンやSAbetaGalなどの老化マーカーが出現した。２週間ごと（隔週で）水曜日に培養を実施することでほぼ半月ごとの新しい細胞群を継続維持し、インビトロでの神経老化の研究のシステムが確立できた。
この系を用いて以下の実験を行った。実験１：インビトロにおける初代培養神経細胞の最長寿命と老化プロセス、実験２：神経細胞の長期培養への外因と内因効果、実験３：長期培養神経細胞内における加齢依存性細胞機構、実験４：非分裂細胞における細胞老化の刻印に関する検討。
海馬ニューロンについては系がほぼ確立したが、ドーパミンニューロンについては培養条件の修正が必要である。また、マウスのニューロンの倍お湯についても試みたが、十分な生存率を得るには、こちらはより高濃度での培養が必要だった。ニューロンの老化の進展につれて蛋白質のアセチル化亢進の実態がみえてきたが、まだ具体的な修飾蛋白の種類やアセチル化サイトの特定ができなかった。
論文投稿をしたが、インビボとの対応データを求められて十分なデータをそろえることができなかった。
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Research Products
(5 results)
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[Journal Article] Spikar, a novel drebrin-binding protein, regulates the formation and stabilization of dendritic spines.2014
Author(s)
Yamazaki H1, Kojima N, Kato K, Hirose E, Iwasaki T, Mizui T, Takahashi H, Hanamura K, Roppongi RT, Koibuchi N, Sekino Y, Mori N, Shirao T.
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Journal Title
J. Neuorchem.
Volume: 128(4)
Pages: 507-522
DOI
Peer Reviewed
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