転写共役因子の多面機能を分割したエネルギー代謝動物モデルシリーズの開発

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24650242
• Research Institution: National Institute of Genetics
• Principal Investigator: 城石 俊彦 国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 教授 (90171058)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2014-03-31
• Keywords: 遺伝学 / ゲノム / 進化 / 変異誘発

Research Abstract

本年度は、Hairless(Hr)遺伝子のコンディショナルノックアウト(KO)マウス（HrKOマウス）の作製および各組織(筋肉、皮膚、脂肪、脳)特異的に組換え酵素Creを発現するトランスジェニック(Tg)マウスの作製を行った。
Hr遺伝子をコンディショナルにKO出来るアリルを持つES細胞からキメラマウスを作製し、野生型マウスと交配後HrKOヘテロ(HrNeo/+)マウスを得た。Neo遺伝子を取り除くため、組換え酵素Flp全身発現マウスと交配し、コンディショナルにKO出来るHrlox/+マウスを得た。
マウスゲノムからCreatine kinase, muscle (Ckm)遺伝子のプロモーターをクローニングし、EGFPCre融合タンパク遺伝子上流に挿入しトランスジーンを作製した。マウス受精卵にトランスジーンをインジェクションし、Ckm-EgfpCreマウスを複数ライン得た。さらにCkm-EgfpCreマウスとRosa26レポーターマウスと交配し、筋肉組織特異的にCreが機能するTgマウスラインの選別を行った。ヒトKertin 5 (KRT5)遺伝子のプロモーターを理化学研究所バイオリソースセンターから入手し、上述と同様に皮膚組織特異的にCreを発現するKRT5-EgfpCreマウスの作製を行った。また、脂肪組織特異的に発現するAdiponectin C1Q（Adipoq）遺伝子のプロモーター制御下でCreを発現するマウス（Adipoq-Creマウス）及び、神経細胞特異的に発現するNestin(Nes)遺伝子のプロモーター制御下でCreを発現するマウス（Nes-CreERT2マウス）は、ジャクソン研究所より購入した。
現在、Adipo-CreマウスおよびCkm-EgfpCreマウスとHrlox/+マウスの交配を行い、各組織特異的HrKOホモ個体を作成中である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

初年度において組織特異的なHrKOホモ個体を作出し、次年度からホモ個体の表現型解析を開始する予定であったが、交配に必要な個体数を得るのに少し時間を要したため、計画より少し進行が遅れている。また、飼育スペースの限界から同時に各組織特異的HrKOホモ個体を生産することが実質的に難しいため、優先的に脂肪組織および筋肉組織におけるコンディショナルKOマウスを作製している。

Strategy for Future Research Activity

エネルギー代謝に関わる表現型のスクリーニングシステムは既にシステム化されているので、各組織特異的なHrKOホモ個体が作出され次第解析が可能である。そのため、各組織特異的なHrKOマウスをそれぞれ順次生産し、引き続き表現型解析を行うことで推進を図る予定である。特に、エネルギー代謝で重要な脂肪組織および筋肉組織におけるHr遺伝子の機能解析を優先的に行う。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

該当なし