2013 Fiscal Year Annual Research Report
損傷乗り越え複製と細胞周期チェックポイントとの新規クロストーク機構の解析
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24651045
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
益谷 央豪 名古屋大学, 環境医学研究所, 教授 (40241252)
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| Keywords | 遺伝子 / 癌 / ゲノム / タンパク質 / 放射線 |
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| Research Abstract |
色素性乾皮症バリアント(XP-V)群の責任遺伝子産物であるヒトPolhは、紫外線照射により生じる主要な2種類のDNA損傷のうちシクロブタン型ピリミジン2量体(CPD)をたいへん効率よく（無傷のDNAの場合と同等の反応効率で）乗り越えて複製することができるが、6-4光産物に対してはヌクレオチドを１つ重合したところで停止してしまい乗り越えて複製することはできない。本課題では、PolhによるTLSが細胞周期チェックポイントの活性化に及ぼす影響を解析した。具体的には、DNA損傷応答の正常なヒト細胞を用いて細胞周期の進行及びS期における細胞周期チェックポイントの活性化を調べた。さらに、Polh欠損細胞で同様の解析を行い、PolhによるCPDのTLSと細胞周期チェックポイントの活性化機構との関係を解析した。また、ヒトPolhを完全に欠失したXP-V群細胞及びこれに恒常的に完全長のPolhを発現させた細胞では、DNA複製ストレスに応答した細胞周期の停止が観察できるのに対して、Polhの一部分だけを発現させた細胞では、細胞周期の停止が不完全となるという現象を見出した。この知見は、Polhが潜在的に、細胞周期チェックポイントと連携する要素を備えていることを示唆している。さらに、PCNAの翻訳後修飾部位変異体を発現した細胞内では、RPAのリン酸化の亢進が観察されたことからもTLSとチェックポイントの連携が示唆された。
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