2013 Fiscal Year Annual Research Report
フシコプラジン類生合成に関する網羅的遺伝子解析と効率的物質生産システムの確立
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24651247
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| Research Institution | Tokushima Bunri University |
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Principal Investigator |
兼目 裕充 徳島文理大学, 薬学部, 助教 (10399438)
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| Keywords | ジテルペノイド / フシコッカン / 分化誘導活性 / fusicoplagin / fusicosciophin / 生合成 / Plagiochila sciophila / 次世代シーケンサー |
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| Research Abstract |
申請者らが苔類コハネゴケより見いだしたフシコッカンジテルペノイド類は、強い動物細胞分化誘導活性等を有することから、フシコクシン/コチレニン類の作用機序の解明や構造活性相関に新たに重要な視点を与える化合物と言える。しかし、コハネゴケは成長が遅く、蓄積は微量であり、生産性のケモタイプが3種存在して採取も難しいことから、安定した供給方法の構築が急務である。本研究はコハネゴケが蓄積するフシコッカンジテルペノイド類の生合成に関わる酵素遺伝子群を網羅的に明らかにすることを目的としている。
前年度はケモタイプＣからはテルペン環化酵素遺伝子断片をはじめ、P450酵素遺伝子、アセチル基転移酵素遺伝子等の生合成酵素遺伝子候補が得られたが、ケモタイプＡに関しては満足なテルペン環化酵素遺伝子断片が得られなかったことから、今年度はポリアデニル鎖を持たないmRNAを得て、次世代シーケンサーによるシーケンスを実施した。ケモタイプＢに関しては当初はフシコカンジテルペノイドが見出されていなかったが、ケモタイプＣのテルペン環化酵素遺伝子候補とよく類似した遺伝子が得られたため、改めてフシコッカンジテルペノイドの精査を行ったところ、ケモタイプＢ独自の微量新規フシコッカンを得ることができた。また、前年度から引き続きテルペン環化酵素酵素遺伝子の全長配列を決定し、大腸菌内で環化産物を蓄積する発現系を用いて機能解析を行った。セスキテルペン炭化水素を環化産物とする酵素遺伝子は得ることができたが、環化産物の得られない環化酵素遺伝子候補がそれぞれのケモタイプにあったことから、これらがフシコッカン骨格を構築する酵素遺伝子と推察された。現在、それぞれのレアコドンを改変した遺伝子配列を構築して機能解析を進めているところである。
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[Journal Article] Seed Dormancy Breaking Diterpenoids, Including Novel Brassicicenes J and K, from Fungus Alternaria brassicicola, and their Necrotic/Apoptotic Activities in HL-60 Cells.2014
Author(s)
Kenmoku, H., Takeuea, S., Oogushi, M., Yagi, Y., Takeshi Sassa, T., Toyota, M., Asakawa, Y
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Journal Title
Natural Product Communications
Volume: 9
Pages: 351-354
Peer Reviewed
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[Journal Article] Seed Dormancy Breaking Diterpenoids from the Liverwort Plagiochila sciophila and their Differentiation Inducing Activity in Human Acute Promyelocytic Leukemia HL-60 Cells.2014
Author(s)
Kenmoku, H., Tada, H., Oogushi, M., EsumiI, T., Takahashi, T., NojiI, M., Sassa, T., Toyota, M., and Asakawa, Y
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Journal Title
Natural Product Communications
Volume: 9
Pages: 印刷中
Peer Reviewed
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