2014 Fiscal Year Annual Research Report
ニューロステロイド・７αーヒドロキシプレグネノロンの生理機能とその作用機序
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24657082
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
清水 貴美子 東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (50451828)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | ニューロステロイド / 哺乳類 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
7α-ヒドロキシプレグネノロン (7α-OH-Preg) は、イモリや鳥類の脳ではその存在が示されているが、哺乳類の脳において存在はまだ明示されていない。本研究では、哺乳類における7α-OH-Pregの生理的役割と合成分泌制御機構を明らかにするため、マウス脳内における7α-OH-Preg の同定と、その生合成系酵素のマウス脳内分布を明らかにすることを目的とした。
マウス脳内における 7α-OH-Preg の実態を示しその定量を行うために、7α-OH-Preg およびその類似ステロイドの分析条件の検討を行った。この結果、高分離能HPLCに精密質量分析法を連動する方法論を開発した（大阪大学蛋白質研究所の高尾敏文教授との共同研究）。一方、脳内の 7α-OH-Preg 生合成に関わる一連の合成酵素群の解析のため、 RT-PCR 法により7α-OH-Preg の産生部位および時刻変動を検討した。この結果、間脳、海馬など、少なくともいくつかの脳部位において合成酵素群の存在が確認でき、間脳において合成酵素の発現量が概日変動することもみいだした。また、マウスにおける 7α-OH-Preg の生理作用を明らかにするため、シリンジポンプによる 7α-OH-Preg の急性脳室内投与および、浸透圧ポンプを用いた２週間連続脳室内投与の２種類の投与をおこない、明暗または恒暗条件下における連続行動量測定をおこなった。活動量、行動リズム周期および行動リズム位相等を解析した結果、少なくとも暗期前半の急性投与ではリズムや活動量に影響が見られなかった。
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