イチゴのアレルギー誘発性評価システムの開発

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24658030
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 宇野 雄一 神戸大学, (連合)農学研究科(研究院), 准教授 (90304120)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鶴田 宏樹 神戸大学, 学内共同利用施設等, 准教授 (20346282) ; 奈邉 健 京都薬科大学, 薬学部, 准教授 (40228078) ; 新田 陽子 岡山県立大学, 保健福祉学部, 准教授 (70403318)
• Keywords: イチゴ / 口腔アレルギー症候群 / バラ科果樹 / シラカバ花粉症

Research Abstract

イチゴにより口腔アレルギー症候群(Oral Allergy Syndrome; OAS)を呈する有症者がいる。OASは健康維持の阻害や症状の重症化を招くと同時に、生産物の消費低迷をもたらす。これを回避するためには、品種選抜や栽培方法の改良が必要である。本研究では、イチゴのOAS誘発性評価法の確立を目指し、次の5項目について研究を実施し、イチゴのメジャーアレルゲンと抗アレルギー成分に関する基礎的知見を得た。
(1)Fra a 1遺伝子の発現レベルの評価：リアルタイムPCRにより解析した結果、Fra a 1遺伝子の相対発現量には品種間差が存在した。また、野生種のF. vescaのEST情報を調査した結果、塩ストレス下でのFra a 1 a2の発現頻度が高かった。
(2)Fra a1タンパク質の解析：大腸菌内で作成した6xHis::Fra a 1融合タンパク質をモルモットに免役し、抗血清を得た。イムノブロットにより調査したFra a 1蓄積量には品種間差があり、遺伝子の発現量と類似していた。塩ストレス下におけるFra a1の蓄積量を調査した結果、40mMのNaClに対する応答性が認められた。
(3)イチゴの抗アレルギー成分の評価：果実の粗抽出液を用いたヒスチジンデカルボキシラーゼ活性阻害試験を行い、阻害率に有意な品種間差が認められた。
(4)シラカバ花粉感作によるイチゴOAS動物実験モデルの開発：シラカバ花粉抗原（Bet V 1）とイチゴ果実抗原（Fra a 1）との交差性について、モルモットにおける受身皮膚アナフィラキシー反応（PCA）を検討した。その結果、明らかな交差性は認められなかったが、その原因を解明するまでには至らなかった。
(5)Fra a 1タンパク質の真空紫外円二色性(VUVCD)スペクトルを測定した結果、加温後の冷却による二次構造の変化が認められた。

Research Products

• [Journal Article] Expression of strawberry allergen Fra a 1 gene during fruit ripening. (2014)
  • Author(s): Futsuki, D., Nitta, Y., Iduhara, M., Tsuruta, H., Tsugehara, T. and Uno, Y.
  • Journal Title: Acta Horticulturae Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Comparison of transcript and protein levels of strawberry allergen Fra a 1 among different cultivars. (2013)
  • Author(s): Narukami, M., Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M., Noguchi, Y. and Uno, Y.
  • Journal Title: International Strawberry Congress (Proceedings) Volume: USB Pages: 6 pages
• [Journal Article] Analysis of IgE binding capacity and stress inducibility of strawberry allergen Fra a 1. (2013)
  • Author(s): Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M. and Uno, Y.
  • Journal Title: International Strawberry Congress (Proceedings) Volume: USB Pages: 6 pages
• [Journal Article] Varietal Differences in Transcript and Protein Levels of Strawberry Allergen Fra a 1 (2013)
  • Author(s): Narukami, M., Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M., Noguchi, Y. and Uno, Y.
  • Journal Title: HortScience Volume: 48 Pages: S308-309
• [Journal Article] Comparison of IgE Binding Capacity and Expression Analysis of Strawberry Allergen Fra a 1 (2013)
  • Author(s): Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M. and Uno, Y.
  • Journal Title: HortScience Volume: 48 Pages: S308
• [Presentation] イチゴアレルゲンFra a 1のIgE反応性と果実における局在 (2013)
  • Author(s): 夫津木大輔、奈邉健、新田陽子、鶴田宏樹、厳原美穂、野口裕司、宇野雄一
  • Organizer: 園芸学会平成25年度秋季大会
  • Place of Presentation: 岩手大学
  • Year and Date: 20130920-20130922
• [Presentation] Comparison of transcript and protein levels of strawberry allergen Fra a 1 among different cultivars. (2013)
  • Author(s): Narukami, M., Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M., Noguchi, Y. and Uno, Y.
  • Organizer: International Strawberry Congress 2013
  • Place of Presentation: Antwerp (Belgium)
  • Year and Date: 20130904-20130906
• [Presentation] Analysis of IgE binding capacity and stress inducibility of strawberry allergen Fra a 1. (2013)
  • Author(s): Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M. and Uno, Y. (2013)
  • Organizer: International Strawberry Congress 2013
  • Place of Presentation: Antwerp (Belgium)
  • Year and Date: 20130904-20130906
• [Presentation] Varietal Differences in Transcript and Protein Levels of Strawberry Allergen Fra a 1. (2013)
  • Author(s): Narukami, M., Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M., Noguchi, Y. and Uno, Y.
  • Organizer: American Society for Horticultural Science Annual Congress 2013
  • Place of Presentation: Palm Desert (California, USA)
  • Year and Date: 20130722-20130725
• [Presentation] Comparison of IgE Binding Capacity and Expression Analysis of Strawberry Allergen Fra a 1. (2013)
  • Author(s): Futsuki, D., Nabe, T., Nitta, Y., Tsuruta, H., Yamazaki, K., Iduhara, M. and Uno, Y. (2013)
  • Organizer: American Society for Horticultural Science Annual Congress 2013
  • Place of Presentation: Palm Desert (California, USA)
  • Year and Date: 20130722-20130725