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2012 Fiscal Year Research-status Report

環境細菌の極貧有機炭素源環境下での生育を司る機構の解明

Research Project

Project/Area Number 24658068
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

永田 裕二  東北大学, 生命科学研究科, 准教授 (30237531)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 大坪 嘉行  東北大学, 生命科学研究科, 助教 (40342761)
津田 雅孝  東北大学, 生命科学研究科, 教授 (90172022)
Project Period (FY) 2012-04-01 – 2014-03-31
Keywords炭酸固定 / 独立栄養細菌 / 環境細菌 / 極貧有機炭素源環境 / 微生物機能開発
Research Abstract

地球表層環境に広く棲息する好気性従属栄養環境細菌群は極貧有機炭素源環境下でも生育する機構を有していると様々な状況証拠から推定されるが、明確な科学的記述が困難であり、未開拓な研究分野である。申請者は、環境汚染物質分解能を有する典型的な好気性従属栄養環境細菌Sphingobium japonicum UT26株の研究過程で、炭素源非添加無機培地で大気中CO2を生体成分として固定して生育可能な突然変異株を取得した。本研究の目的は、十分な科学的再現性の元に分子機構の解明が可能な本系を利用して、新規なCO2固定系が関与すると推定される本細菌株が有する極貧有機炭素源環境下での生育機構の全貌を解明し、さらに、本機構の好気性従属栄養細菌群における普遍性を明らかにし、細菌の極貧栄養条件下での培養という広範な応用への可能性を検討することである。
本年度は、特に「UT26株でadhX遺伝子が高発現すると炭素源非添加無機培地で生育可能となる現象」に着目して研究を実施し、以下の結果を得た。(1)adhX遺伝子高発現株でも大気中の標識CO2の取り込みが観察された。(2)adhX遺伝子産物のアルコールデヒドロゲナーゼ(ADH)活性に必須と推定されるアミノ酸残基に変異を導入した変異型adhX高発現株では、ADH活性は低下したが、当該表現型に変化はなく、ADH活性と当該表現型との明確な関連性は見出されなかった。(3)adhX高発現株のトランスポゾン変異株ライブラリーを作製し、当該表現型に変異を持つ株を得た。さらに、これらのトランスポゾン挿入部位から、当該表現型に関与する遺伝子として、推定acetyl-CoA synthetase遺伝子、推定pyruvate/phosphate dikinase遺伝子、推定isocitrate lyase遺伝子を同定した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

adhX高発現株でも大気中の標識CO2の取り込みが確認できたことに加え、当該表現型に関与する3つの遺伝子を新たに同定することができたため。

Strategy for Future Research Activity

(1)adhX自身の機能解析の継続
(2)adhX高発現株を利用して同定した、当該表現型に関与する3つの遺伝子の機能の解明
(3)当該表現型に関与する他の遺伝子の同定と解析
(4)他の環境細菌株でのadhXホモログの機能に関する研究
上記(1)~(3)により、本現象の分子機構を明らかにすると共に、(4)により、普遍性と応用への可能性を検討する。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

上記研究を実施するために、多量の分子生物学および生化学研究用の試薬を使用する。また、研究支援のための謝金を必要とする。さらに、学会等において、情報の収集と成果の発表を行う予定である。

  • Research Products

    (41 results)

All 2013 2012

All Journal Article (8 results) (of which Peer Reviewed: 8 results) Presentation (33 results) (of which Invited: 4 results)

  • [Journal Article] Coinetgrate-resolution of toluene-catabolic transposon Tn46512013

    • Author(s)
      Yano, H., H. Genka, Y. Ohtsubo, Y. Nagata, E.M. Top, M. Tsuda
    • Journal Title

      Plasmid.

      Volume: 69 Pages: 24-35

    • DOI

      10.1016/j.plasmid.2012.07.004

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Complete genome sequence of Acidovorax sp. KKS102, a polychlorinated biphenyl-degrading strain2012

    • Author(s)
      Ohtsubo Y, Maruyama F, Mitsui H, Nagata Y, Tsuda M
    • Journal Title

      J Bacteriol

      Volume: 194 Pages: 6970-6971

    • DOI

      10.1128/JB.01848-12

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] ParI, an orphan ParA family protein from Pseudomonas putida KT2440-specific genomic island, interferes with the partition system of IncP-7 plasmids2012

    • Author(s)
      Miyakoshi M, Shintani M, Inoue K, Terabayashi T, Sai F, Ohkuma M, Nojiri H, Nagata Y, Tsuda M
    • Journal Title

      Environ Microbiol.

      Volume: 14 Pages: 2946-2959

    • DOI

      10.1111/j.1462-2920.2012.02861.x

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Crystallization and preliminary X-ray analysis of the haloalkane dehalogenase DatA from Agrobacterium tumefaciens C582012

    • Author(s)
      Mase, T., H. Yabuki, M. Okai, J. Ohtsuka, F. L. Imai, Y. Nagata, and M. Tanokura
    • Journal Title

      Acta Crystallographica Section F

      Volume: F68 Pages: 652-654

    • DOI

      10.1107/S1744309112013942

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Conjugal transfer of polychlorinated biphenyl/biphenyl degradation genes in Acidovorax sp. strain KKS102, which are located on an integrative and conjugative element2012

    • Author(s)
      Ohtsubo Y., Y. Ishibashi, H. Naganawa, S. Hirokawa, S. Atobe, Y. Nagata, M. Tsuda
    • Journal Title

      J Bacteriol

      Volume: 194 Pages: 4237-4248

    • DOI

      10.1128/JB.00352-12

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Suppression of pleiotrophic phenotypes of Burkholderia multivorans fur mutant by oxyR mutation2012

    • Author(s)
      A. Kimura et al.
    • Journal Title

      Microbiology

      Volume: 158 Pages: 1284-1293

    • DOI

      10.1099/mic.0.057372-0

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Povotal role of anthranilate dioxygenase genes in the adaptation of Burkholderia multivorans ATCC 17616 in soil2012

    • Author(s)
      E. Nishiyama et al.
    • Journal Title

      FEMS Microbiology Letters

      Volume: 330 Pages: 46-55

    • DOI

      10.1111/j.1574-6968.2012.02532.x

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] γ-hexachlorocyclohexane dehydrochlorinase gene with its flanking regions from soil by activity-based screening techniques2012

    • Author(s)
      M. Ito et al.
    • Journal Title

      European J. Soil Biology

      Volume: 52 Pages: 16-19

    • DOI

      10.1016/j.ejsobi.2012.05.001

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 人為起源物質分解細菌の出現と進化2013

    • Author(s)
      永田裕二
    • Organizer
      日本農芸化学会 第20回記念フロンティアシンポジウム
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130327-20130328
    • Invited
  • [Presentation] 芳香族化合物複合汚染土壌における新規芳香族化合物分解酵素遺伝子の機能相補に基づく探索2013

    • Author(s)
      永山浩史ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130324-20130327
  • [Presentation] 人為起源環境汚染物質分解能を有するスフィンゴモナス細菌群のゲノムと可動性遺伝因子に関する研究2013

    • Author(s)
      永田裕二ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130324-20130327
  • [Presentation] ハロアルカンデハロゲナーゼ DatAの立体構造解析2013

    • Author(s)
      管 立軍ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130324-20130327
  • [Presentation] 多様な細菌のゲノム上に存在するハロアルカンデハロゲナーゼの機能解析2013

    • Author(s)
      田中裕興ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130324-20130327
  • [Presentation] IncP-9群 NAH7接合伝達系のoriTを中心とした解析2013

    • Author(s)
      岸田康平ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130324-20130327
  • [Presentation] フィニッシング支援ツールGenoFinisherとAceFileViewer2013

    • Author(s)
      大坪嘉行ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130324-20130327
  • [Presentation] γ-HCH分解細菌Sphingomonas sp. MM-1株が有する多重プラスミドに関する研究2013

    • Author(s)
      田端理朗ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2013年大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      20130324-20130327
  • [Presentation] リダクターゼ機能相補による新規芳香族化合物分解酵素遺伝子の芳香族化合物複合汚染土壌メタゲノムからの探索2013

    • Author(s)
      永山浩史ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] 土壌細菌Burkholderia multivorans ATCC17616株におけるFurの機能及び発現制御機構の解析2013

    • Author(s)
      佐藤拓哉ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] gamma-HCH分解能を示すSphingobium属細菌のTKS株とMI1205株の全ゲノム配列決定とgamma-HCH分解関与遺伝子群周辺領域の解析2013

    • Author(s)
      大畑智史ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] 人為起源物質分解能を有するsphingomonad細菌群のゲノムと可動性遺伝因子2013

    • Author(s)
      永田裕二ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] Finishing関連の3つのツール: GenoFinisher、AceFileViewer、ShortReadManager2013

    • Author(s)
      大坪嘉行ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] IncP-9群プラスミドNAH7の接合伝達開始配列の解析2013

    • Author(s)
      岸田康平ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] 次世代シーケンサーによる土壌細菌の環境適応遺伝子の新規探索手法 の開発2013

    • Author(s)
      石橋蓉子ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] 撹乱に対する土壌微生物のレジリエンス2013

    • Author(s)
      加藤広海ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] 細菌群集動態のモデリング2013

    • Author(s)
      伊藤貴広ら
    • Organizer
      第7回日本ゲノム微生物学会年会
    • Place of Presentation
      長浜
    • Year and Date
      20130308-20130310
  • [Presentation] Genetic analysis of multiple plasmids in γ-hexachlorocylohexane-degrading bacterium Sphingomonas sp. MM-12012

    • Author(s)
      M. Tabata et al.
    • Organizer
      International Forum for Ecosystem Adaptability Science IV: Interface Between Policy and Science
    • Place of Presentation
      Sendai, Japan
    • Year and Date
      20121212-20121213
  • [Presentation] Analysis of nitrogen-related phosphotransferase system in recipient cells involved in regulation of conjugative transfer2012

    • Author(s)
      K. Inoue et al.
    • Organizer
      International Forum for Ecosystem Adaptability Science IV: Interface Between Policy and Science
    • Place of Presentation
      Sendai, Japan
    • Year and Date
      20121212-20121213
  • [Presentation] ハロアルカンデハロゲナーセLinBのbeta-HCH分解活性に関する機能進化2012

    • Author(s)
      田中裕興ら
    • Organizer
      第85回日本生化学会大会・第35回日本分子生物学会年会合同大会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      20121211-20121214
  • [Presentation] 有機塩素系殺虫剤gamma-HCH分解細菌のゲノムと可動性遺伝因子に関する研究2012

    • Author(s)
      永田裕二ら
    • Organizer
      第64回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20121023-20121026
  • [Presentation] 細菌ゲノムに存在する多様なハロアルカンデハロゲナーゼ遺伝子の機能解析2012

    • Author(s)
      田中裕興ら
    • Organizer
      第64回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20121023-20121026
  • [Presentation] 有機塩素系殺虫剤gamma-HCH分解細菌が突然変異により炭素源非添加無機寒天培地上で生育可能となる機構の解析2012

    • Author(s)
      平野丈ら
    • Organizer
      第64回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20121023-20121026
  • [Presentation] Genomes and mobile genetic elements of gamma-hexachlorocyclohexane-degrading bacterial strains2012

    • Author(s)
      Y. Nagata et al.
    • Organizer
      15th International Biotechnology Symposium and Exhibition (IBS 2012)
    • Place of Presentation
      Daegu, Korea
    • Year and Date
      20120916-20120921
  • [Presentation] Isolation of aromatic ring-hydroxylating oxygenase genes by cultivation-independent functional screening of metagenome from soil artificially contaminated with aromatic hydrocarbons2012

    • Author(s)
      H. Nagayama et al.
    • Organizer
      15th International Biotechnology Symposium and Exhibition (IBS 2012)
    • Place of Presentation
      Daegu, Korea
    • Year and Date
      20120916-20120921
  • [Presentation] Multiple plasmids of γ-hexachlorocylohexane-degrading bacterium Sphingomonas sp. MM-12012

    • Author(s)
      M. Tabata et al.
    • Organizer
      International Plasmid Biology Conference 2012
    • Place of Presentation
      Santander, Spain
    • Year and Date
      20120911-20120916
  • [Presentation] Relationship between intergeneric conjugative transfer of plasmid NAH7 and nitrogen-related phosphotransferase system2012

    • Author(s)
      K. Inoue et al.
    • Organizer
      International Plasmid Biology Conference 2012
    • Place of Presentation
      Santander, Spain
    • Year and Date
      20120911-20120916
  • [Presentation] Response of soil microbial community against pulse perturbation by aromatic pollutants2012

    • Author(s)
      H. Kato et al.
    • Organizer
      14th International Symposium on Microbial Ecology
    • Place of Presentation
      Copenhagen, Denmark
    • Year and Date
      20120819-20120824
  • [Presentation] 細菌由来のβ-ヘキサクロロシクロヘキサン (β-HCH) 分解酵素linB_MIを導入したカボチャ毛状根のβ-HCH分解能の解析2012

    • Author(s)
      七里吉彦ら
    • Organizer
      第30回 日本植物細胞分子生物学会 (生駒) 大会・シンポジウム
    • Place of Presentation
      奈良県生駒市
    • Year and Date
      20120803-20120805
    • Invited
  • [Presentation] 環境汚染物質gamma-hexachlorocyclohexaneの分解能を有するSphingobium sp. TKS株のゲノム構造の解明2012

    • Author(s)
      大畑智史ら
    • Organizer
      環境バイオテクノロジー学会2012年度大会
    • Place of Presentation
      宇治
    • Year and Date
      20120625-20120626
  • [Presentation] 培養非依存的手法を用いた芳香族化合物複合汚染土壌からの新規分解酵素遺伝子の探索2012

    • Author(s)
      永山浩史ら
    • Organizer
      環境バイオテクノロジー学会2012年度大会
    • Place of Presentation
      宇治
    • Year and Date
      20120625-20120626
  • [Presentation] 細菌の有機塩素系殺虫剤分解資化能力を支えるABCトランスポーター2012

    • Author(s)
      永田裕二、遠藤諒、大坪嘉行、津田雅孝
    • Organizer
      第7回トランスポーター研究会年会
    • Place of Presentation
      京都
    • Year and Date
      20120609-10
    • Invited
  • [Presentation] Metagenomic Analysis of Microbial Community in Soil Contaminated with Aromatic Pollutants2012

    • Author(s)
      M. Tsudaら
    • Organizer
      Japan-Finland Biotechnology Symposium 2012
    • Place of Presentation
      Sendai, Japan
    • Year and Date
      20120604-20120608
    • Invited

URL: 

Published: 2014-07-24  

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