2013 Fiscal Year Annual Research Report
乳酸菌によるペプチド腸管送達系の構築と炎症性腸疾患治療への応用
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24658099
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| Research Institution | Fukuoka University |
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Principal Investigator |
見明 史雄 福岡大学, 薬学部, 教授 (50248522)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鹿志毛 信広 福岡大学, 薬学部, 教授 (80185751)
佐藤 朝光 福岡大学, 薬学部, 助教 (90369025)
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| Keywords | 乳酸菌 / CTB-YVAD複合体 / 抗炎症作用 / 炎症性腸疾患 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、caspase-1の活性化を阻害するYVAD(チロシン-バリン-アラニン-アスパラギン酸)をCholera Toxin B subunit (CTB)との融合体として分泌する乳酸菌を作出し、炎症性腸疾患 (IBD)の治療薬として応用することにある。昨年度は、乳酸菌Lactobacillus caseiによるCTB-YVAD融合タンパク質の分泌および精製に成功した。よって、本年度は、ヒト腸管上皮由来Caco-2細胞を用いて、精製したCTB-YVADの抗炎症作用を検討した。
1. CTB-YVADはCaco-2細胞内に侵入する。
Vibrio choleraeが産生するCTBは、上皮細胞の細胞膜に存在するGM1-gangliosideを介して細胞内に侵入する。そこで、CTB-YVADを曝露したCaco-2細胞からタンパク質を抽出し、抗CT抗体を用いたウエスタンブロットを行った結果、CTB-YVADがCaco-2細胞内に検出された。
2. CTB-YVADは抗炎症作用を持つ。
LPSにより炎症を誘発したCaco-2細胞の細胞内タンパク質をにおいて、CTB-YVADはcaspase-1の活性化を阻害した。また、caspase-1の活性化は、炎症性サイトカインinterleukin (IL)-1βの遊離を促すことから、LPSとCTB-YVADを曝露したCaco-2細胞の培養上清中のIL-1β量を測定した結果、CTB-YVADはLPSによるIL-1βの遊離を阻害した。
以上のことから、L. caseiに分泌させたCTB-YVADは、上皮細胞内に侵入後、caspase-1の活性化およびIL-1βの遊離を阻害することで、抗炎症作用を示すことが明らかと成った。よって、CTB-YVADを分泌するL. caseiは、新たなIBD治療薬と成り得る可能性があると考えられる。
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[Journal Article] Recombinant fusion protein of cholera toxin B subunit with YVAD secreted by Lactobacillus casei inhibits lipopolysaccharide- induced caspase- 1 activation and subsequent IL- 1 beta secretion in Caco- 2 cells2014
Author(s)
Yukihiro Hiramatsu, Masatatsu Yamamoto, Tomomitsu Satho, Keiichi Irie, Akiko Kai, Saori Uyeda, Yuki Fukumitsu, Akihisa Toda, Takeshi Miyata, Fumio Miake, Takeshi Arakawa, Nobuhiro Kashige
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Journal Title
BMC Biotechnology
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
Peer Reviewed
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[Journal Article] Expression and secretion of cholera toxin B subunit in lactobacilli2013
Author(s)
Takahiro Okuno, Nobuhiro Kashige, Tomomitsu Satho, Keiichi Irie, Yukihiro Hiramatsu, Tanjina Sharmin, Yuki Fukmits, Saori Uyeda, Seitaro Yamada, Tetsuya Harakuni, Takeshi Miyata, Takeshi Arakawa, Masumi Imoto, Akihisa Toda, Yukihiko Nakashima, Fumio Miake
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Journal Title
Biological and Pharmaceutical Bulletin
Volume: 36(6)
Pages: 952-958
Peer Reviewed
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