ＭＤＳにおける異常クローン拡大メカニズムの解明

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24659458
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 真田 昌 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20529044)
• Keywords: 骨髄異形成症候群 / RNAスプライシング / 遺伝子変異 / 造血幹細胞

Research Abstract

遺伝子解析研究により、骨髄異形成症候群MDSではRNAスプライシングに関わる遺伝子群に高頻度かつ特徴的に変異が生じていることが明らかとなったが、その分子メカニズムは依然として不明である。MDS例において、本変異獲得細胞が選択されるにも関わらず、マウス造血幹細胞への本変異体導入実験では、変異獲得による生物学的優位性は観察されない。本研究では、何故、本変異を獲得した細胞がクローナルに増殖し得るかを明らかとすることで、MDS特有の分子病態の解明を目指した。スプライシング分子変異はTET2の不活化変異としばしば合併することから、TET2 条件的欠失マウスを用いて、TET2が不活化された細胞において、代表的なスプライシング分子変異であるU2AF1ならびにSRSF2変異導入細胞が優位性を獲得し得るか検証した。すなわち、造血細胞特異的にTET2を誘導的に欠失させたマウスからCD34-KSL（造血幹細胞）を採取し、レトロウィルスベクターを用いて遺伝子導入を行い、致死量の放射線を照射したマウスに骨髄移植を行った。野生型マウス由来に比し、TET2ホモ欠失マウスを用いた移植の末梢血キメリズム解析では、競合細胞に対するキメリズムは高くなったが、依然として野生型ならびに空ベクターに比し、キメリズムは低く、優位性は確認できなかった。遺伝子導入実験において期待すべき生物学的効果がされない理由の一つとして、強制発現系を用いており生理的な発現量との違いによる作用の差が大きいと想定される。そこで、Cre-loxPシステムを用いて変異アレルを生理的なプロモーターのもと、誘導的かつ造血細胞特異的に発現させられるマウスの作成し、変異アレルの発現を確認した。今後、それらのマウスおよび同マウス由来の造血幹細胞を用いて検討を続ける予定である。

Research Products

• [Journal Article] Somatic RHOA mutation in angioimmunoblastic T cell lymphoma. (2014)
  • Author(s): Sakata-Yanagimoto M, et al, Sanada M, et al. (25/35)
  • Journal Title: Nat Genet Volume: 46 Pages: 171-5
  • DOI: 10.1038/ng.2872
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Haploinsufficiency of Sf3b1 leads to compromised stem cell function but not to myelodysplasia. (2014)
  • Author(s): Matsunawa, M. Yamamoto, R. Sanada, M. Sato-Otsubo, A. Shiozawa, Y. Otsu, M. Isono, K. Koseki, H. Nakauchi, H. Ogawa, S.
  • Journal Title: Leukemia Volume: In press Pages: In press
  • DOI: 10.1038/leu.2014.73
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Landscape of genetic lesions in 944 patients with myelodysplastic syndromes.. (2014)
  • Author(s): Haferlach T, Nagata Y, Grossmann V, Okuno Y, Bacher U, Nagae G, Schnittger S, Sanada M, Kon A, Alpermann T, Yoshida K, Roller A, Nadarajah N, Shiraishi Y, Shiozawa Y, Chiba K, Tanaka H, Koeffler HP, Klein HU, Dugas M, Aburatani H, Kohlmann A, Miyano S, Haferlach C, Kern W, Ogawa S.
  • Journal Title: Leukemia Volume: 28 Pages: 241-247
  • DOI: 10.1038/leu.2013.336
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clonal leukemic evolution in myelodysplastic syndromes with TET2 and IDH1/2 mutations. (2014)
  • Author(s): Lin, T. L. Nagata, Y. Kao, H. W. Sanada, M. Okuno, Y. Huang, C. F. Liang, D. C. Kuo, M. C. Lai, C. L. Lee, E. H. Shih, Y. S. Tanaka, H. Shiraishi, Y. Chiba, K. Lin, T. H. Wu, J. H. Miyano, S. Ogawa, S. Shih, L. Y.
  • Journal Title: Haematologic Volume: 99 Pages: 28-36
  • DOI: 10.3324/haematol.2013.091249
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Concurrent loss of Ezh2 and Tet2 cooperates in the pathogenesis of myelodysplastic disorders (2013)
  • Author(s): Muto T, Sashida G, Oshima M, Wendt GR, Mochizuki-Kashio M, Nagata Y, Sanada M, Miyagi S, Saraya A, Kamio A, Nagae G, Nakaseko C, Yokote K, Shimoda K, Koseki H, Suzuki Y, Sugano S, Aburatani H, Ogawa S, Iwama A.
  • Journal Title: J Exp Med Volume: 210(12) Pages: 2627-39
  • DOI: 10.1084/jem.20131144
• [Journal Article] Somatic SETBP1 mutations in myeloid malignancies (2013)
  • Author(s): Makishima H, Yoshida K, Nguyen N, Przychodzen B, Sanada M, Okuno Y, Ng KP, Gudmundsson KO, Vishwakarma BA, Jerez A, Gomez-Segui I, Takahashi M, Shiraishi Y, Nagata Y, Guinta K, Mori H, Sekeres MA, Chiba K, Tanaka H, Muramatsu H, Sakaguchi H, Paquette RL, McDevitt MA, Kojima S, Saunthararajah Y, Miyano S, Shih LY, Du Y, Ogawa S, Maciejewski JP.
  • Journal Title: Nat Genet Volume: 45(8) Pages: 942-6
  • DOI: 10.1038/ng.2696
• [Journal Article] BCOR and BCORL1 mutations in myelodysplastic syndromes and related disorders (2013)
  • Author(s): Damm F, et al, Sanada M, et al, *Kosmidar O. (8/31)
  • Journal Title: Blood Volume: 122 Pages: 3169-77
  • DOI: 10.1182/blood-2012-11-469619
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Recurrent mutations in multiple components of the cohesin complex in myeloid neoplasms. (2013)
  • Author(s): Kon A, et al, Sanada M, et al, *Ogawa S. (4/41)
  • Journal Title: Nat Genet. Volume: 122 Pages: 1232-7
  • DOI: 10.1038/ng.2731
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The landscape of somatic mutations in Down syndrome-related myeloid disorders (2013)
  • Author(s): Yoshida K, et al, Sanada M, et al, *Ogawa S. (7/33)
  • Journal Title: Nat Genet Volume: 45 Pages: 1293-9
  • DOI: 10.1038/ng.2759
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] An empirical Bayesian framework for somatic mutation detection from cancer genome sequencing data (2013)
  • Author(s): Shiraishi, Y. Sato, Y. Chiba, K. Okuno, Y. Nagata, Y. Yoshida, K. Shiba, N. Hayashi, Y. Kume, H. Homma, Y. Sanada, M. Ogawa, S. Miyano, S.
  • Journal Title: Nucleic Acids Res Volume: 41 Pages: e89
  • DOI: 10.1093/nar/gkt126
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Exome sequencing identifies secondary mutations of SETBP1 and JAK3 in juvenile myelomonocytic leukemia (2013)
  • Author(s): Sakaguchi, H. Okuno, Y. Muramatsu, H. Yoshida, K. Shiraishi, Y. Takahashi, M. Kon, A. Sanada, M. Chiba, K. Tanaka, H. Makishima, H. Wang, X. Xu, Y. Doisaki, S. Hama, A. Nakanishi, K. Takahashi, Y. Yoshida, N. Maciejewski, J. P. Miyano, S. Ogawa, S. Kojima, S.
  • Journal Title: Nat Genet Volume: 45 Pages: 937-41
  • DOI: 10.1038/ng.2698
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Deep sequencing in cancer research. (2013)
  • Author(s): Yoshida K, Sanada M, Ogawa S.
  • Journal Title: Jpnj clin oncol. Volume: 43 Pages: 110-5
  • DOI: 10.1093/jjco/hys206
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] ACTN1 Mutations Cause Congenital Macrothrombocytopenia (2013)
  • Author(s): Kunishima, S. Okuno, Y. Yoshida, K. Shiraishi, Y. Sanada, M. Muramatsu, H. Chiba, K. Tanaka, H. Miyazaki, K. Sakai, M. Ohtake, M. Kobayashi, R. Iguchi, A. Niimi, G. Otsu, M. Takahashi, Y. Miyano, S. Saito, H. Kojima, S. Ogawa, S.
  • Journal Title: Am J Hum Genet Volume: 92 Pages: 431-8
  • DOI: 10.1016/j.ajhg.2013.01.015
  • Peer Reviewed
• [Presentation] AMLにおけるゲノム異常 (2013)
  • Author(s): 眞田 昌
  • Organizer: 第７５回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 札幌
  • Year and Date: 20131012-20131012
  • Invited
• [Presentation] Role of Sf3b1 on hematopoiesis
  • Author(s): Manabu Matsunawa, Ryo Yamamoto, Masashi Sanada, Aiko Sato, Yusuke Shiozawa, Kenichi Yoshida, Yasunobu Nagata, Ayana Kon, Tetsuichi Yoshizato, Makoto Otsu, Kyoichi Isono, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, and Seishi Ogawa
  • Organizer: 55th Annual Meeting of American Society of Hematology
  • Place of Presentation: New Orleans
• [Presentation] FUNCTIONAL ANALYSIS OF COHESIN MUTATIONS IN MYELOID NEOPLASMS
  • Author(s): Ayana Kon, Masashi Sanada, et al. (2/20)
  • Organizer: 18th Congress of the European Hematology Association
  • Place of Presentation: Stockholm
• [Presentation] Role of Sf3b1 on hematopoiesis
  • Author(s): Manabu Matsunawa, Ryo Yamamoto, Masashi Sanada, Aiko Sato, Yusuke Shiozawa, Kenichi Yoshida, Yasunobu Nagata, Ayana Kon, Tetsuichi Yoshizato, Makoto Otsu, Kyoichi Isono, Haruhiko Koseki, Hiromitsu Nakauchi, and Seishi Ogawa
  • Organizer: 第75回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 札幌