2012 Fiscal Year Research-status Report

胎児子宮内発育遅延の新しい病因としての自然免疫受容体ＮＯＤ１リガンドの解析

Research Project

Project/Area Number	24659509
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	原寿郎九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (40150445)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	西尾壽乘九州大学, 大学病院, 研究員 (00507783) 永田弾九州大学, 医学(系)研究科(研究院), その他 (20570790)
Project Period (FY)	2012-04-01 – 2014-03-31
Keywords	子宮内発育遅延 / 自然免疫受容体 / NOD1
Research Abstract	自然免疫受容体のひとつであるNOD1と、子宮内胎児死亡（IUFD）や胎児子宮内発育遅延（IUGR）といった周産期疾患との関連を調査するため、NOD1の人工合成リガンドを妊娠マウス（野生株とNOD1ノックアウトマウス）に1回皮下注射した。予想通り、NOD1リガンドによってIUFDまたはIUGRが惹起されることが確認できた。胎仔体液を質量分析計（LC/MS）およびNOD1レポーター細胞を用いて解析し、母獣に投与したNOD1リガンドが胎仔へ移行していることを確認できた。以上から、NOD1リガンドは母獣から胎仔へ経胎盤移行し、児へ影響を及ぼすことが推定された。次に、NOD1リガンド投与母獣由来胎仔の体液中サイトカインを測定し、MCP-1が比較的特異的に上昇していることを見いだした（蛋白質およびmRNAレベルで確認した）。その産生源を見いだすため、胎仔の各臓器を採取し解析したところ、主に血管からMCP-1が産生されていた（蛋白質およびmRNAレベルで確認した）。以上から、NOD1リガンドは胎仔の血管炎を惹起していることが示唆された。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason NOD1リガンドを母獣に投与すると、胎仔へ経胎盤移行し、IUFDやIUGRが惹起されることが確認でき、予想通りだった。胎仔において血管炎が惹起されていることが示唆されたが、病理組織学的検索で血管炎の根拠は未だ見いだせていない。
Strategy for Future Research Activity	妊娠マウス（野生株およびノックアウトマウス）に対し、NOD1リガンドの量や投与経路、投与回数を調節して、現象を確認する。NOD1リガンドが胎仔に与える影響およびその機序について、病理組織学的検索（免疫組織化学染色）を中心に解析を進める予定である。また、原因を同定できていないヒトIUGR発症母子の血清や尿中のNOD1リガンドの有無を、LC-MSやレポーター細胞を用いて評価し、臨床背景との関連性を解析する予定である。
Expenditure Plans for the Next FY Research Funding	実験動物購入・飼育 60万円　サイトカイン解析　60万円レポーター細胞および培養検査試薬　58万円　LC-MS試薬　20万円病理評価試薬（抗体等）　30万円　成果発表（国内旅費）　10万円その他　10万円