ミオスタチンの制御による新しいＯＡ治療法の開拓

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24659683
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 新井 祐志 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50347449)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岸田 綱郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (00370205) ; 久保 俊一 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20178031) ; 寺内 竜 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20575154)
• Keywords: ミオスタチン / hiPS細胞

Research Abstract

ヒト・ケラチノサイトにEBVエピゾーマルベクターを用いてOct3/4、Klf4、Sox2、c-Myc、Lin28遺伝子を導入し、human induced pluripotent stem (hiPS)細胞を作製した。
hiPS細胞をレチノイン酸存在下で10日間培養し筋芽細胞に分化させた。分化培養中にrecombinant human myostatin protein (rhMyostatin)を添加することでMyoD、Myo5aの発現誘導を抑制し、筋芽細胞分化を有意に抑制した。rhMyostatinを添加したhiPS由来胚性体細胞培養では対照群と比較して6日目から10日目において細胞の増殖率が有意に低下した。また、10日目の培養細胞において、myosin heavy chainとalpha actinに対する免疫組織化学染色を行ったところ、rhMyostatin添加群で有意に発現が低下していた。さらに、Myostatinに対するsiRNA（siMyostatin）を用いて抑制実験を行ったところ、hiPS由来胚性体細胞を培養しsiMyostatinを導入した。siMyostatin導入群におけるMyoDとmyosin heavy chainの遺伝子発現は対照siRNA群と比較して有意に亢進していた。
これらの結果からヒトiPS細胞から筋芽細胞への分化および増殖においてMyostatinが重要な役割を担っている事が示された。

Research Products

• [Journal Article] Myostatin acts as an autocrine/paracrine negative regulator in myoblast differentiation from human induced pluripotent stem cells. (2013)
  • Author(s): Gao F, Kishida T, Ejima A, Gojo S, Mazda O
  • Journal Title: Biochemical and Biophysical Research Communications Volume: 431 Pages: 309-314
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.12.105
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Anti-inflammatory effects of lansoprazole by suppressing ROS production in murine macrophage RAW 264.7 cells (2014)
  • Author(s): Shohei Ichimaru, Shuji Nakagawa, Yuji Arai, Shinji Tsuchida, Hiroaki Inoue, Tomohiro Matsuki, Yasuo Mikami, Takumi Ikeda, Ryo Oda, Osam Mazda, Toshikazu Kubo
  • Organizer: Orthopaedic Research Society
  • Place of Presentation: New Orleans
  • Year and Date: 20140315-20140318
• [Presentation] The expression levels of connexin 43 in human synovium of rheumatoid arthritis (2014)
  • Author(s): Tomohiro Matsuki, Yuji Arai, Shinji Tsuchida, Ryu Terauchi, Hiroaki Inoue, Shuji Nakagawa, Atsuo Inoue, Kuniaki Honjo, Toru Morihara, Toshiharu Shirai, Osam Mazda, Toshikazu Kubo
  • Organizer: Orthopaedic Research Society
  • Place of Presentation: New Orleans
  • Year and Date: 20140315-20140318
• [Presentation] Sonoporation-mediated transduction of siena targeting TNF alpha ameliorated experimental arthritis (2014)
  • Author(s): Inoue H, Arai Y, Terauchi R, Nakagawa S, Saito M, Tsuchida S, Inoue A, Matsuki T, Morihara T, Shirai T, Mazda O, Kubo T
  • Organizer: Orthopaedic Research Society
  • Place of Presentation: New Orleans
  • Year and Date: 20140315-20140318
• [Presentation] 関節リウマチ滑膜におけるconnexin43の発現 (2013)
  • Author(s): 松木智宏、新井祐志、土田真嗣、本城邦晃、中川周士、井上裕章、寺内竜、松田修、久保俊一
  • Organizer: 第28回日本整形外科学会基礎学術集会
  • Place of Presentation: 千葉
  • Year and Date: 20131017-20131018