2012 Fiscal Year Research-status Report
子宮内膜症組織に発現する新規エストロゲン受容体バリアント群の分子基盤解析
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24659731
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
原田 省 鳥取大学, 医学部, 教授 (40218649)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊澤 正郎 鳥取大学, 医学部, 准教授 (50032222)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | 子宮内膜症 / アロマターゼ遺伝子 / 高エストロゲン環境 / エストロゲン受容体発現 / エストロゲン受容体バリアント / 選択的翻訳 |
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| Research Abstract |
子宮内膜症病態の特質の一つであるアロマターゼ遺伝子高発現は、子宮内膜症病変組織に高濃度エストロゲン環境をもたらしている。この高濃度エストロゲン環境と密接にリンクするエストロゲン受容体(ER)の病理的意義は、内分泌療法剤の有効性から認知されている。しかしながら、ER発現の理解は、α型とβ型の発現量比による議論で停滞している。最近、私共は、異なる機能性を想定させる一群のERバリアントの発現が示唆されたことから、見出したERバリアント発現の分子基盤の詳細を解明して、新規の診断治療法開発へつなげることを目標とした。
本年度は、 ER発現の分子基盤を検証する事を目的に、以下の検討を試みた。 (1)子宮内膜症患者由来間質細胞初代培養(子宮内膜症細胞)と正所性子宮内膜由来間質細胞初代培養(子宮内膜細胞)を調整して使用。(2)ERα、ERβのmRNA発現について、子宮内膜症細胞と子宮内膜細胞におけるER転写物発現をバリアント特異的PCRによる検討。(3)ER発現へ関与するプロモーターの解析の5'UTRエキソン特異的RT-PCRによる検証。(4)ウエスタンブロットによるER発現の検証。
これらの研究により、以下の①～③の成果を得た。特に、③の成果は想定外の発見である。
①子宮内膜症細胞と子宮内膜細胞におけるER発現の基本的分子基盤を明らかにした。同時に、活性プロモーターを同定した。②子宮内膜症細胞では、α型エストロゲン受容体発現は低レベルでありβ型発現は高レベルであった。③興味ある事に、α型発現は野生型でなく、低分子量受容体バリアントであることが判明した。この発見は、新たな選択的翻訳メカニズムの可能性を示唆し、新たな重要研究課題となった。
以上の発見を伴う研究展開により、当初の研究計画を修正して、次年度へ継続展開することとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
発見した低分子エストロゲン受容体α型バリアントの発現は、子宮内膜症における高濃度エストロゲン環境の病理的意義を理解する新たな手掛かりを提供する事が期待される。症例を重ねた今後の検証が必要であるが、その機能の解明も重要な研究課題となった。
子宮内膜症はエストロゲン依存性疾患であり、今回の発見は新たな子宮内膜症治療の展望を開く可能性がある。
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| Strategy for Future Research Activity |
発見した低分子エストロゲン受容体α型バリアントの機能性を解明して、同時に発現するエストロゲン受容体β型との関連を理解することが重要と思われる。最近、エストロゲン受容体β型発現に関して、複数のバリアント発現が示唆されている。子宮内膜症におけるエストロゲン受容体発現の実体解明は、子宮内膜症病態を理解する第一段階となる。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
想定しなかったエストロゲン受容体α型バリアントの発見により、その確定のために基礎研究を行った。そのために、
当初の研究計画を変更した結果、翌年度への当該経費(437,859円)の繰り越しが生じた。平成24年度の研究過程で発見した低分子エストロゲン受容体α型の機能性の解明と、同時に発現するエストロゲン受容体β型との関連について、以下の3点に焦点を絞り研究を実施する。
1)エストロゲン受容体α型とβ型を介するホルモン応答性遺伝子の発現アレイ解析。
2)β型受容体バリアント発現の検証とα型とβ型の2量体形成能の検証。
3)α型受容体とβ型受容体の組織内分布の検証。
研究費は、本年度繰り越し分を合わせ、発現アレイ解析用のキット、受容体特異リガンド試薬、受容体特異抗体、遺伝子発現解析キット、免疫検出用試薬の消耗品経費と、学会発表、論文発表の経費として使用予定である。
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