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2013 Fiscal Year Annual Research Report

歯髄細胞を用いた網膜再生治療法の開発

Research Project

Project/Area Number 24659756
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

中澤 徹  東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30361075)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 田中 佑治  東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40625513)
Keywords網膜障害 / 歯髄細胞 / 細胞治療 / 低酸素培養 / 浮遊培養 / 幹細胞
Research Abstract

平成24年度から実施しているNMDA障害ラット眼に対する初代歯髄由来細胞移植の効果を再検証した。定量的PCR法にて網膜神経節細胞特異的なマーカー(Brn3a, Brn3b, Brn3c)の発現量を評価したところ、前年度準備実験で得られた効果を再現できなかった。一方で歯髄由来細胞を平面培養したのちに網膜神経節細胞障害モデルに移植することで神経保護効果が得られることが報告されたことをうけ(Mead et al IOVS 2013)、培養法方法の検証を中心に行うこととした。幹細胞性を維持した培養法として低酸素培養法や浮遊培養法があるが両者の相乗効果を歯髄由来細胞に対して検証した。常酸素と比較して、低酸素(酸素濃度1%)では、形成される細胞塊の数はサイズ分布を維持したまま半減することが分かった。次に遺伝子発現量解析にて、低酸素応答分子であるHif1a、 Phd2、 Phd3、Vegfa、Fn1の発現量の上昇とPhd1の発現量減少、軸索再生への関与が報告されているSprr1a、前年度細胞塊形成能を有する細胞のセレクションに有用であることを確認したCD105の発現量が上昇することが明らかになった。Sprr1aとCD105タンパク質の細胞塊内での局在を免疫染色法にて確認したところ、サイズの小さい細胞塊では全体に両者の発現が確認されたが、大きい細胞塊では周辺部に局在しており、共に低酸素培養により強陽性になることを確認した。軸索障害モデルマウスの網羅的遺伝子発現定量解析でもSprr1aの発現が上昇しており、軸索再生への寄与が期待された。

  • Research Products

    (18 results)

All 2014 2013 Other

All Journal Article (7 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (9 results) (of which Invited: 3 results) Remarks (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Molecular and cellular features of murine craniofacial and trunk neural crest cells as stem cell-like cells.2014

    • Author(s)
      Hagiwara K, Obayashi T, Sakayori N, Yamanishi E, Hayashi R,Osumi N, Nakazawa T, Nishida K.
    • Journal Title

      PLoS One

      Volume: 9(1) Pages: e84072-1, 13

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0084072. eCollection 2014.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] RNA sequence reveals mouse retinal transcriptome changes early after axonal injury2014

    • Author(s)
      Yasuda M, Tanaka Y, Ryu M, Tsuda S, Nakazawa T
    • Journal Title

      PLoS One

      Volume: 9(3) Pages: e93258-1, 11

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0093258

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A polymeric device for controlled transscleral multi-drug delivery to the posterior segment of the eye2014

    • Author(s)
      Nagai N, Kaji H, Onami H, Ishikawa Y, Nishizawa M, Osumi N, Nakazawa T, Abe T
    • Journal Title

      Acta Biomater

      Volume: 10 Pages: 680, 687

    • DOI

      10.1016/j.actbio.2013.11.004

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 緑内障における神経保護治療2014

    • Author(s)
      津田聡、中澤徹
    • Journal Title

      Medical Science Digest

      Volume: 40 (3) Pages: 14, 17

  • [Journal Article] Critical role of Nrf2 in oxidative stress-induced retinal ganglion cell death2013

    • Author(s)
      Himori N, Yamamoto K, Maruyama K, Ryu M, Taguchi K, Yamamoto M, Nakazawa T
    • Journal Title

      J Neurochem

      Volume: 127 Pages: 669, 680

    • DOI

      10.1111/jnc.12325

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of azo-based fluorescent probes to detect different levels of hypoxia2013

    • Author(s)
      Piao W, Tsuda S, Tanaka Y, Maeda S, Liu F, Takahashi S, Kushida Y, Komatsu T, Ueno T, Terai T, Nakazawa T, Uchiyama M, Morokuma K, Nagano T, Hanaoka K
    • Journal Title

      Angew Chem Int Ed Engl

      Volume: 52 Pages: 13028, 13032

    • DOI

      10.1002/anie.201305784

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 緑内障に対する神経保護薬の研究開発2013

    • Author(s)
      田中佑治、中澤徹
    • Journal Title

      眼科

      Volume: 55(5) Pages: 601, 607

  • [Presentation] 緑内障、神経保護治療からのアプローチ2013

    • Author(s)
      中澤徹
    • Organizer
      函館眼科医会学術講演会
    • Place of Presentation
      函館
    • Year and Date
      20131018-20131018
    • Invited
  • [Presentation] 近未来の緑内障神経保護治療へのアプローチ2013

    • Author(s)
      中澤徹
    • Organizer
      ファガン発売1周年記念講演 in 千葉
    • Place of Presentation
      幕張
    • Year and Date
      20130928-20130928
    • Invited
  • [Presentation] RNA-Seqによるマウス視神経挫滅極早期における網膜網羅的遺伝子発現定量解析2013

    • Author(s)
      田中佑治、安田正幸、中澤徹
    • Organizer
      第24回日本緑内障学会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20130921-20130923
  • [Presentation] 視神経挫滅モデルにおけるROCK阻害薬K-115の神経保護効果2013

    • Author(s)
      山本耕太郎、丸山和一、檜森紀子、中澤徹
    • Organizer
      第24回日本緑内障学会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20130921-20130923
  • [Presentation] 基礎研究を踏まえた夢のある近未来治療2013

    • Author(s)
      中澤徹
    • Organizer
      広島大学・山口大学眼科Grand Rounds
    • Place of Presentation
      山口
    • Year and Date
      20130914-20130914
    • Invited
  • [Presentation] 低酸素応答生理活性蛍光プローブを用いた網膜低酸素領域のin vivo イメージング2013

    • Author(s)
      津田聡、田中佑治、朴文、國方彦志、横山悠、安田正幸、花岡健二郎、長野哲雄、中澤徹
    • Organizer
      第117回日本眼科学会総会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20130404-20130407
  • [Presentation] ナノ粒子による副腎皮質ステロイド治療薬開発2013

    • Author(s)
      中澤徹
    • Organizer
      第117回日本眼科学会総会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20130404-20130407
  • [Presentation] エリスロポエチンノックアウトマウスを用いた網膜・視神経の組織学的検討2013

    • Author(s)
      安田正幸、劉孟林、田中佑治、檜森紀子、面高宗子、横山悠、雪田昌克、津田聡、 丸山和一、山本雅之、中澤 徹
    • Organizer
      第117回日本眼科学会総会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20130404-20130407
  • [Presentation] 酸化ストレスによる網膜神経節細胞死におけるカルパインの働き2013

    • Author(s)
      横山悠、劉孟林、山本耕太郎、安田正幸、田中佑治、丸山和一、中澤徹
    • Organizer
      第117回日本眼科学会総会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20130404-20130407
  • [Remarks] 東北大眼科

    • URL

      http://www.oph.med.tohoku.ac.jp

  • [Patent(Industrial Property Rights)] 視神経障害発祥リスクの判定方法2014

    • Inventor(s)
      田中佑治、安田正幸、面高宗子、中澤徹
    • Industrial Property Rights Holder
      田中佑治、安田正幸、面高宗子、中澤徹
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      特願2014-17481
    • Filing Date
      2014-01-31

URL: 

Published: 2015-05-28  

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