2014 Fiscal Year Annual Research Report
ｉＰＳ細胞由来視細胞シート作成とそれを用いた網膜神経間ネットワーク構築機構の解明
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24659769
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| Research Institution | St. Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
上田 裕司 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (00223470)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 視細胞 / 転写因子 / ロドプシン / 網膜 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
網膜は光情報受容の主体である神経網膜と網膜色素上皮から構成されている。網膜組織は中枢神経系由来の組織で再生能を持たない。iPS細胞を用いて網膜を構成する細胞を分化誘導して、これを細胞シートとして２次元像を結ぶことができる形の網膜修復を目指している。ここではマウスiPS 細胞にpax6 を導入し作成した視細胞前駆細胞株 (Suzuki N, et al. Establishment of retinal progenitor cell clones by transfection with Pax6 gene of mouse induced pluripotent stem (iPS) cells. Neuroscience Letters 2012.2 509(2): 116-120）を用いた。このiPS 由来の細胞株は特定の培養条件下で高純度に杆体視細胞あるいは錐体視細胞に分化する。
ここでは高純度視細胞を温度感応性ポリマーを応用してシート状に培養して高度なシナプス再形成を行わせて、より生体に近い網膜神経層ことに視細胞層の再構築を行なった。このシートを構築する細胞はほぼ全てがβⅢ tubulin陽性の神経細胞で様々な成長因子、ケモカインに反応して更に分化する。この細胞はSDF1の受容体であるCXCR4を細胞表面に発現している。SDF1存在下での培養により視細胞前駆細胞マーカーである CD73を発現する（最大陽性率 93％）。SDF1は視細胞分化に関わる転写因子群のうちotx2, rx, crx, nrlの発現を増強して、一方、mst1やtrβ２の発現には影響しなかった。さらなる検討は必要だが至適濃度のSDF1存在下では Rhodopsin陽性細胞群は Rhodopsin50％程度陽性となっている。この方法でかなり高純度の杆体視細胞が得られることが明らかになった。
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[Journal Article] Pax7 Gene Induction Rapidly Regulates Myocyte Homeostasis in Human Induced Pluripotent Stem (iPS) Cells.2015
Author(s)
Misawa H, Saito A, Shimizu J, Iinuma M, Shiratsuchi T, Fujiwara N, Takai K, Arimitsu N, Ueda Y, Wakisaka S, Suzuki T, Beppu M, Suzuki N.
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Journal Title
St. Marianna Medical Journal.
Volume: 5
Pages: 59-67
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