2014 Fiscal Year Annual Research Report
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24659842
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| Research Institution | Ohu University |
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Principal Investigator |
加藤 靖正 奥羽大学, 歯学部, 教授 (50214408)
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2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | SPARC / AP-1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
SPARCは，マトリセルラープロテインである．これまでにマウスの3系統のSPARCのノックアウト(KO)マウス肺に共通して発現が上昇している遺伝子として，CAMP，NGP，SAA3を同定していたので，今年度はCRISPER/Cas9システムによるゲノム編集によりB16BL6メラノーマ細胞からSPARC遺伝子をKOした細胞を作製し，その効果の普遍性を検討した．その結果，KOマウスの肺同様にCAMP，NGP，SAA3遺伝子の発現上昇が確認され，さらにMMP3やMMP9発現も上昇することも見出された．これらの遺伝子発現には，AP-1の関与が重要なので，構成因子であるc-Fosやc-Junの発現を調べてみると，SPARC KO細胞では，ホルボルエステル刺激でc-Fosやc-Jun発現が顕著に上昇することを見出した．さらに別の系として骨髄ストローマ細胞であるST2細胞を用いて，SPARCをKOするとホルボルエステル刺激でAP-1活性が上昇することが見出された．一方，SPARCは分泌蛋白質であるが，細胞内で作用している可能性を考え，SPARCをKOしたB16-BL6細胞にシグナル配列の異なるSPARC発現ベクター構築し，安定細胞株を得た．すなわち，シグナル配列を欠失したSPARC delta signal vector，トリプシノーゲンのシグナル配列に置換した SPARC PPT-signal vector，ワイルドタイプのシグナル配列を有したSPARC WT-signal vectorである．その結果，SPARC PPT-signalベクター導入株とSPARC WT-signalベクター導入株で細胞内局在が酷似していた．このことは，SPARCの細胞内作用を強く示唆するものである．従って，SPARCは，AP-1の活性を制御する細胞内因子であることが示唆された．
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[Journal Article] Suppressed rate of carcinogenesis and decreases in tumour volume and lung metastasis in CXCL14/BRAK transgenic mice2015
Author(s)
Hata R, Izukuri K, Kato Y, Sasaki S, Mukaida N, Maehata Y, Miyamoto C, Akasaka T, Yang X, Nagashima Y, Takeda K, Kiyono T, Tniguchi M
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 5
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] Neutrophlic granule proteins (Ngp) is a SPARC target gene to be reduced2014
Author(s)
Kato Y, Maeda T, Suzuki A, Yuzawa S, Baba Y, Miyamoto C, Maehata Y, Ozawa S, Kubota E, Hata R
Organizer
15th International Biennial Congress the Metastasis Research Society
Place of Presentation
Heidelberg, Germany
Year and Date
2014-06-28 – 2014-07-01
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