2012 Fiscal Year Research-status Report
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24659910
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Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
山城 隆 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (70294428)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柳田 剛志 岡山大学, 大学病院, 助教 (90534793)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | オートファジー / ATG5 / 遺伝子改変動物 / 部位特異的ノックアウトマウス |
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| Research Abstract |
本研究では、骨形成におけるオートファジーの役割と制御を検討する。Atg5-/-マウスは出生直後致死であるため骨組織のin vivo の解析は不可能である。この問題を解決するために、Cre-LoxP システムを用いて、骨組織特異的かつ薬剤の投与中にのみAtg5 の機能を阻害するAtg5 コンディショナルノックアウトマウスを作成している。
本年度は骨特異的なTwist2-Creを用いて、Twist2プロモーター下においてのみ、Atg5の機能が阻害されるコンディショナルノックアウトマウスを作成を試みた。その結果、今春胎仔を得た。少なくとも、このマウスは胎生致死ではなく、一見、表現型は観察されなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
骨組織特異的にオートファジーを不活化できるマウスの作成に要約成功した。このマウスは胎生致死ではなく、他の臓器等でのオートファジー機能不全による影響はないと考えられる。今後は、このマウスの成長過程において生じる骨での表現型を観察する予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度作成したTwist2-Cre:Atg5 flox/floxマウスを用いて、骨における表現型を観察する。特に、生後６週の遺伝子改変動物の大腿骨や頭蓋骨を用いて、マイクロCTによる骨梁の観察と、in situ hybridizationやrealtime-PCRによる遺伝子発現の解析を行う予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
次年度は、本年度作成したTwist2-Cre:Atg5 flox/floxマウスを維持する。そして、この遺伝子改変動物の骨の表現型の解析は、マイクロCT解析、やin situ hybridization、real time PCRを用いて行う予定である。また、骨の石灰化等の観察は外部委託で行う予定である。
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