2012 Fiscal Year Annual Research Report
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24680042
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Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
松尾 直毅 京都大学, 白眉センター(生命科学系キャリアパス形成ユニット), 准教授 (10508956)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 記憶 / マウス |
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| Research Abstract |
申請者らが開発した"任意の時期に任意の行動刺激により活動した細胞集団のみに、任意の遺伝子操作を行うことが可能なトランスジェニックマウス"のシステム(Science 2007, 2008)を用いて、記憶の獲得時に活動した細胞選択的にチャネルロドプシン(ChR2)やDREADD(Designer Receptors Exclusively Activated by Designer Drug)などの神経活動操作分子が発現するマウスを作製する。これらのマウスを用いて、記憶獲得の一定期間(24時間、30日)後に、様々な脳領域の機能的細胞集団の人為的再活動操作を行い、記憶の想起を誘導することができるかを行動実験により明らかにする。その時期・脳領域と、記憶想起の関係について解析を行い、記憶情報がコードされる基本メカニズムに関して時空間的な観点を加えて考察する。
初年度は、そのために必要なtetO-ChR2Tgマウスの作製を行った。ChR2は、特定波長の光により活性化して陽イオンを透過し、発現神経細胞の脱分極を引き起こす膜タンパク質である。ChR2は様々なタイプのものが存在するため、その特性が本研究課題の目的に合致するものを検討した(Yizhar et al., Neuron 2011)。また、通常のtet0プロモーターでは、誘導されたChR2の作動期間はChR2タンパク質の半減期に依存する一時的なものである。そこで、記憶獲得時に活動した神経細胞集団においてChR2を長期的に発現させるために、Dox非依存的な変異型tTA(H100Y)を利用したポジティブフィードバックループ発現システムを導入した。ベクターの作製を行い、精製DNA断片をC57BL/6Jの受精卵に注入し、4匹のファウンダーマウスを得た。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究課題の申請時に記載した内容をほぼ達成しているので、おおむね順調に進展していると言える。
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| Strategy for Future Research Activity |
作製したマウスの評価および解析を予定通り行う。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
作製した遺伝子改変マウスの誕生が予定より若干遅れたことに伴い、飼育費や餌費用を次年度に繰り越した。これらの費用は計画した研究を遂行するために、適正に使用する。
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