2013 Fiscal Year Annual Research Report
謎の巨大粒子ボルトの全立体構造決定から機能解明への道を切り開く
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24687020
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
田中 秀明 大阪大学, たんぱく質研究所, 准教授 (40346169)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | ボルト / 脂質ラフト / X線結晶構造解析 |
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| Research Abstract |
我々が2009年に報告した3.5オングストローム分解能のボルトの構造では、ウェスト周辺の電子密度がディスオーダーしており、このことからボルトのウェスト部分（MVPのN末端同士）の会合は非常に弱く、そのために高分解能結晶を得る事が難しいのではないかと考えた。そこで、MVPのN末端上流をロイシンジッパー（LZ）で固定した粒子（LZボルト）を作成することを考え、昆虫細胞を用いた大量発現系の構築に成功した。その結果、非常に均一な安定したボルト粒子を作成することができ、本試料を用いて作成した結晶はSPring-8のBL44XUにおける回折実験で最高2.8オングストローム分解能の回折点を与えた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
MVPのN末端上流をロイシンジッパーで固定したLZボルトを結晶化試料として用いることにより、SPring-8のBL44XUにおける回折実験で最高2.8オングストローム分解能の回折点を得る事に成功しており、平成26年度内の高分解能回折強度データ収集および構造決定の見通しが立った。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、さらに結晶凍結条件を最適化することで平成26年度内の高分解能回折強度データ収集が可能となるので、26年度前半に高分解能回折強度データ収集を完了し、後半には構造決定を成功させたい。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
基金分の次年度に90万円を繰り越したため。
平成26年度の人件費として使用する。
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