2012 Fiscal Year Annual Research Report
マクロファージによる腎結石貪食作用の機能解析と溶解療法への応用
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24689060
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
岡田 淳志 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (70444966)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 尿路結石 / 結石消失現象 / マクロファージ / M-CSF |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、私たちが発見した「マクロファージ(Mφ)の腎結晶処理能力」に着目し、健常者のMΦが腎結石の貧食能力に優れていることが「結石防御因子」の1つであると考え、以下の3つの方法により腎結石溶解療法につなげる研究をすることである。
1.MΦ機能不全マウスへのM-CSF投与による腎結石予防効果
Macrophage colony stimulation factor (Csfl)遺伝子欠損マウス(op/op)を導入した。尻尾より抽出したDNAのCsf1変異領域を含むPCRを行い、制限酵素によるPCR産物の断片化をゲル電気泳動にて確認する。またより簡便で正確なgenotypingのために、TaqMan[○!R] probeを用いたSNP typing assayの技術を応用したプライマー・TaqMan[○!R] probeの設計を行った。さらにこれらのマウスを繁殖させることに成功した。8週齢雄のop/opおよび野生型に対し、腎結石モデルマウスの手法に順じ、シュウ酸前駆物質グリオキシル酸(GOx)80mg/kgを6日間腹腔内投与を行い、血液・尿・腎の採取を行った。Pizzolato染色および偏光顕微鏡による観察で、腎結石形成を確認および定量化した。また免疫染色によってマクロファージの関連遺伝子発現を確認した。採取した腎から蛋白を抽出し、western blotingを、またmRNAを抽出し、定量PCRを行うことによって、関連遺伝子発現を再確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究計画通りの成果が上がっているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在の通り、共同研究者ならびに研究補助者への指示・連絡を密にし、予定通り研究を遂行する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
本年度購入したオールインワン蛍光顕微鏡を使い、更に研究を進める予定である。また、データ整理と実験補助のため実験助手を雇用する予定であり、そのための人件費も必要である。次年度は学会や論文発表に要する英文校正料、学会参加費、国内外学会参加のための旅費にも使用する予定である。なお、平成24年度ではob/obマウスのgenotyping primerの作成に予定より時間を費やしてしまった上、海外より搬入する遺伝子変異マウスの追加購入並びに関連試薬類の購入が滞ったため、次年度使用額が発生した。
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[Journal Article] Mitocondrial permeability transition pore opening induces the initial process of renal calcium crystallization.2012
Author(s)
Niimi Kazuhiro, Yasui Takahiro, Hirose Masahito, Hamamoto Shuzo, Itoh Yasunori, Okada Atsushi. Kubota Yasue, Kojima Yoshiyuki, Tozawa Keiichi, Sasaki Shoichi, Hayashi Yutaro, Kohri Kenjiro
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Journal Title
Free Radical Biology & Medicine
Volume: 52
Pages: 1207-1217
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Active phagocytosis and processing of calcium oxalate monohydrate crystals in an in vitro macrophage model.2013
Author(s)
Okada Atsushi, Yasui Takahiro, Zuo Li, Taguchi Kazumi, Fujii Yasuhiro, Itoh Yasunori, Hirose Yasuhiko, Uasami Masayuki, Niimi Kazuhiro, Ando Ryosuke, Kobayashi Takahiro, Hamamoto Shuzo, Hirose Masahito, Itoh Yasuhiko, Tozawa Keiichi, Kohri Kenjiro
Organizer
European Association of Urology Annual Meeting 2013
Place of Presentation
Milan(Italy)
Year and Date
20130315-20130319
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[Presentation] Pioglitazone : A peroxisome proliferator-activated receptor gamma agonist, prevents kidney stone formation via antioxidative and anti-inflammatory effects.2012
Author(s)
Taguchi Kazumi, Okada Atsushi, Kobayashi Takahiro, Hamamoto Shuzo, Ando Ryosuke, Hirose Masahito, Yasui Takahiro, Tozawa Keiichi, Hayashi Yutaro, Kohri Kenjiro
Organizer
第32回国際泌尿器科学会(SIU)
Place of Presentation
福岡国際会議場(福岡県)
Year and Date
20120930-20121004
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[Presentation] Laparoscopic adrenalectomy for solitary metastatic adrenal tumor of lung cancer origin.2012
Author(s)
Kawai Noriyasu, Naiki Taku, Etani Toshiki, Nagata Daisuke, Mizuno Kentaro, Okada Atsushi, Umemoto Yukihiro, Yasui Takahiro, Akita Hidetoshi, Kojima Yoshiyuki, Okamura Takehiro, Tozawa Keiichi, Sasaki Shoichi, Hayashi Yutaro, Kohri Kenjiro
Organizer
30th World Congress of Endourology and SWL
Place of Presentation
Istanbul (Turkey)
Year and Date
20120904-20120908
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[Presentation] The histological reaction of foreskin after testosterone treatment prior to hypospadias surgery.2012
Author(s)
Nihio Hidenori, Mizuno Kentaro, Moritoki Yoshinobu, Imura Makoto, Kamisawa Hideyuki, Okada Atsushi, Umemoto Yukihiro, Ko!jima Yoshiyuki, Tozawa Keiichi, Hayashi Yutaro, Kohri Kenjiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2012
Place of Presentation
Atlanta(USA)
Year and Date
20120519-20120524
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[Presentation] Administration of the selective alpha 1A adrenoceptor antagonist silodosin facilitates expulsion of 1.5mm or larger distal ureteral stones, as compared to control.2012
Author(s)
Itho Yasunori, Okada Atsushi, Hirose Masahito, Kobayashi Takahiro, Niimi Kazuhiro, Kojima Yoshiyuki, Kubota Yasue, Yasui Takahiro, Tozawa Keiichi, Sasaki Shoichi, Kohri Kenjiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2012
Place of Presentation
Atlanta(USA)
Year and Date
20120519-20120524
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[Presentation] The role of long-term loading of cholesterol in renal crystal formation.2012
Author(s)
Fujii Yasuhiro, Okada Atsushi, Taguchi Kazumi, Hamamoto Shuzo, Hirose Masahito, Itoh Yasunori, Yasui Takahiro, Kojima Yoshiyuki, Tozawa Keiichi, Hayashi Yutaro, Kohri Kenjiro
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2012
Place of Presentation
Atlanta(USA)
Year and Date
20120519-20120524
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[Presentation] Bisphosphonate prevents urolithiasis in men with osteoporosis by reducing the urinary ion activity product of calcium stone.2012
Author(s)
Yasui Takahiro, Okada Atsushi, Taguchi Kazumi, Hirose Yasuhiko, Fujii Yasuhiro, Niimi Kazuhiro, Usami Masayuki, An do Ryosuke, Hamamoto Shuzo, Kobayashi Takahiro, Hirose Masahito, Kubota Yasue, et al.
Organizer
American Urological Association Annual Meeting 2012
Place of Presentation
Atlanta(USA)
Year and Date
20120519-20120524
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