2013 Fiscal Year Annual Research Report
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24700381
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| Research Institution | University of the Ryukyus |
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Principal Investigator |
仲嶺 三代美 琉球大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20381105)
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| Keywords | ErbBファミリー / MAPキナーゼ / GT1-7細胞 / PKD / Fyn / PYK2 |
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| Research Abstract |
ゴナドトロピン放出ホルモン（GnRH）は、視床下部に存在するGnRHニューロンによって産生・分泌される。GnRHの産生・分泌の調節は、正常な性成熟にとって非常に重要な役割を担っており、GnRHニューロンの機能を統合的に理解することは重要である。
本研究ではGnRHニューロンの細胞培養株であるGT1-7細胞を用いて、GnRH受容体刺激による細胞内のシグナル伝達機構について研究を行い、GnRH受容体の刺激によってERKの活性化およびErbB4が切断されることを明らかにした。それら機構を詳細に解析した結果、
（１）Cキナーゼのダウンレギュレーション実験では、ErbB4の切断が抑制されたことから、ErbB4の切断にCキナーゼが関与することが分かった。また、GnRH刺激によるERKの活性化では、PKCδがPKDを活性化することが明らかとなった。これらCキナーゼはGnRH刺激によって膜に局在し、活性化されることが示唆された。（２）GnRHおよびPMAの刺激によって、速やかにPKDがダウンレギュレーションされることを見出した。（３）免疫沈降実験によって、PYK2と相互作用するSrcファミリーのアイソフォームがFynであることを示す結果が得られた。（４）昨年度、DNAマイクロアレイによる網羅的な発現解析によって、GnRH刺激後に発現の変動する遺伝子群を同定した。今年度は、それら遺伝子の発現をRT-PCR法およびウエスタンブロッティングにて確認した。MAPキナーゼの脱リン酸化酵素(DUSPs)のうち、少なくとも２種類のアイソフォームの発現がGnRH刺激後30～60分で増加していることが分かった。
これら研究によって、GT1-7細胞ではGnRH受容体の刺激によってERKが活性化され、その後ERKの脱リン酸化酵素の発現が上昇することが示唆された。
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