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2014 Fiscal Year Annual Research Report

フェントン反応は生体内で鉄還元反応により引き起こされるのか?

Research Project

Project/Area Number 24780081
Research InstitutionTokyo University of Agriculture

Principal Investigator

佐藤 純一  東京農業大学, 応用生物科学部, 助教 (70439884)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywords鉄 / 鉄還元酵素 / フラビン
Outline of Annual Research Achievements

今年度は、大腸菌において鉄還元反応に関与するフラビン還元酵素を探索し、精製酵素を用いた遊離フラビン、鉄貯蔵タンパク質との反応解析を試みた。更に、還元されたフラビンの反応解析も行った。また、大腸菌の鉄制限培養時における精製酵素の発現解析を試みた。
1.大腸菌におけるフラビン還元活性を有する酵素の精製と反応解析:今年度、大腸菌の無細胞抽出液からフラビン還元活性を有する画分が6つ分画された。これらの画分は遊離フラビン存在下においてのみ鉄貯蔵タンパク質内の三価鉄を還元し、二価鉄として放出した。特にフラビン還元活性の強い2つの画分について更に精製を行い、精製標品を得た。この2つの精製酵素も遊離フラビン存在下でのみ鉄貯蔵タンパク質からの二価鉄放出反応と鉄還元反応を示した。
2.還元遊離フラビンの反応解析:還元された遊離フラビンは反応性が高く、細胞内では様々な物質と反応を示すと予想される。遊離の還元フラビンを調製し、酸素や各種鉄化合物との反応を解析した。その結果、各種鉄化合物で反応速度に違いが観察され、中でもFe(III)-EDTAが最も高速に反応した。この速度は遊離フラビンと酸素との反応速度よりも速かった。
3.大腸菌鉄制限培養時における精製酵素の発現解析:大腸菌を鉄十分条件、鉄制限条件で培養し、遺伝子発現解析、タンパク質発現解析を試みた。精製酵素の中でもフラビン還元活性を有し、既知の鉄還元酵素として報告済みのferredoxin NADP+ reductase (Fpr)は、鉄制限条件下でタンパク質の発現上昇が観察された。しかし、遺伝子発現解析ではFprをコードする遺伝子、それ以外の精製酵素をコードする遺伝子とも顕著な発現誘導は観察されなかった。

  • Research Products

    (8 results)

All 2015 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (7 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] NADH oxidase and alkyl hydroperoxide reductase subunit C (peroxiredoxin) from Amphibacillus xylanus form an oligomeric assembly2015

    • Author(s)
      Toshiaki Arai, Shinya Kimata, Daichi Mochizuki, Keita Hara, Tamotsu Zako, Masafumi Odaka, Masafumi Yohda, Fumio Arisaka, Shuji Kanamaru, Takashi Matsumoto, Shunsuke Yajima, Junichi Sato, Shinji Kawasaki, Youichi Niimura
    • Journal Title

      FEBS Open Bio

      Volume: 5 Pages: p. 124―131

    • DOI

      10.1016/j.fob.2015.01.005

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 大腸菌におけるフラビン還元酵素による鉄貯蔵タンパク質からの二価鉄放出反応2015

    • Author(s)
      佐藤純一、中元翔太、石井達也、武田晃治、吉村悦郎、中川純一、阿部晃、木俣真弥、川崎信治、新村洋一
    • Organizer
      日本農芸化学会2015年大会
    • Place of Presentation
      岡山大学津島キャンパス
    • Year and Date
      2015-03-26 – 2015-03-29
  • [Presentation] Amphibacillus xylanusのNADH oxidase (Nox)-AhpC (Prx)複合体の溶液構造2015

    • Author(s)
      木俣真弥、望月大地、原敬太、松本崇、矢嶋俊介、有坂文雄、金丸周司、佐藤純一、川崎信治、新村洋一
    • Organizer
      日本農芸化学会2015年大会
    • Place of Presentation
      岡山大学津島キャンパス
    • Year and Date
      2015-03-26 – 2015-03-29
  • [Presentation] Amphibacillus xylanusにおける遊離フラビンが関与する好気代謝と微生物界における遊離フラビンの分布 (第2報)2015

    • Author(s)
      木俣真弥、富塚駿、名須川哲哉、望月大地、藤田信之、阿部晃、中川純一、佐藤純一、川崎信治、新村洋一
    • Organizer
      日本農芸化学会2015年大会
    • Place of Presentation
      岡山大学津島キャンパス
    • Year and Date
      2015-03-26 – 2015-03-29
  • [Presentation] 光合成生物におけるタンパク質非結合フラビンが関与する鉄還元酵素反応2015

    • Author(s)
      佐藤純一、関野滉太、田中英資、森鉄也、石井達也、武田晃治、吉村悦郎、中川純一、阿部晃、新町文絵、木俣真弥、川崎信治、新村洋一
    • Organizer
      日本農芸化学会2015年大会
    • Place of Presentation
      岡山大学津島キャンパス
    • Year and Date
      2015-03-26 – 2015-03-29
  • [Presentation] 微生物と植物におけるタンパク質非結合フラビン2015

    • Author(s)
      佐藤純一、関野滉太、富塚駿、田中英資、石井達也、新町文絵、木俣真弥、川崎信治、新村洋一
    • Organizer
      第56回日本植物生理学会年会
    • Place of Presentation
      東京農業大学世田谷キャンパス
    • Year and Date
      2015-03-16 – 2015-03-18
  • [Presentation] Iron release from iron storage protein by Escherichia coli ferric reductases in the presence or absence of free flavins2014

    • Author(s)
      Junichi Sato and Shinya Kimata
    • Organizer
      18th International Symposium on Flavins and Flavoproteins
    • Place of Presentation
      the Regent Cha-Am Beach Resort
    • Year and Date
      2014-07-27 – 2014-08-01
    • Invited
  • [Presentation] NADH oxidase-AhpC (Prx) system functional as NADH oxidase and NADH peroxidase <Protein interaction and its physiological role in Amphibacillus xylanus>2014

    • Author(s)
      D. Mochizuki, S. Kimata, T. Matsumoto, T. Arai, K. Hara, J. Sato, S. Kawasaki, S. Kanamaru, F. Arisaka and Y. Niimura.
    • Organizer
      18th International Symposium on Flavins and Flavoproteins
    • Place of Presentation
      the Regent Cha-Am Beach Resort
    • Year and Date
      2014-07-27 – 2014-08-01

URL: 

Published: 2016-06-01  

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