2013 Fiscal Year Annual Research Report
新規ホスホリラーゼを活用した機能性オリゴ糖のライブラリー構築及び網羅的機能性評価
Project/Area Number |
24780095
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Research Institution | Niigata University |
Principal Investigator |
中井 博之 新潟大学, 自然科学系, 助教 (00400002)
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Keywords | 酵素 / オリゴ糖 |
Research Abstract |
生体内糖質代謝に関与する糖質加リン酸分解酵素(ホスホリラーゼ)による糖質合成収率は極めて高く、産業上有用な酵素になり得る。しかしながら、既知のホスホリラーゼは報告例が少なく、今後生産可能なオリゴ糖のバリエーション拡大には、新たな反応特異性を 有するホスホリラーゼの発見が必須であった。本研究では様々な生物種のゲノム情報を活用して、これまでに報告例のない新規なホスホリラーゼを見出し、各種酵素の糖受容体特異性を明らかにすることで、新規オリゴ糖のライブラリー構築を試みた。Glycoside Hydr olase Family 65、94、130に属するホスホリラーゼ様タンパク質をコードする遺伝子群をPCR法により単離し、大腸菌による異種宿主発現系を確立した。得られた組み換え酵素の詳細な機能性解析の結果、これまでに報告例のない基質特異性を有するホスホリラーゼを複数発見することができた。また今回得られた新規ホスホリラーゼ群の詳細な糖受容体特異性を調査することで、多種多様ななヘテロオリゴ糖の合成にも成功している。加えて、本研究で行った新規ホスホリラーゼの発見および機能解明は、当該ホスホリラーゼ群が関与する新たな生体内糖質代謝機構を提唱することに繋がり、生物学的意義からも学術的に重要な研究と評価できる。
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[Presentation] セロビオン酸ホスホリラーゼの発見2014
Author(s)
仁平高則, 斉藤由華, 西本完, 北岡本光, 五十嵐圭日子, 伏信進矢, 中井博之, 大坪研一
Organizer
日本農芸化学会平成26年度大会
Place of Presentation
東京, 明治大学
Year and Date
20140327-20140330
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