2013 Fiscal Year Annual Research Report
特定タンパク質と架橋形成能を有する多価性糖鎖配位体の設計と展開
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24780111
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| Research Institution | Fukushima National College of Technology |
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Principal Investigator |
尾形 慎 福島工業高等専門学校, その他部局等, 助教 (10532666)
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| Keywords | 糖鎖 / クラスター材料 / レクチン / ウイルス |
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| Research Abstract |
前年度（平成24年度）の研究においてモデルタンパク質として用いたニホンニワトコレクチン（SSA）に対して高親和性を有し架橋複合体形成を形成可能な四価配糖体の開発に成功している。平成25年度は、他の植物レクチンおよびウイルスに対して同様の活性を有する新規多価性糖鎖リガンドの開発を行った。
１）N-アセチルラクトサミン認識レクチン（ECA）に対する多価性糖鎖リガンドの機能設計
始めに、N-アセチルラクトサミン（LacNAc）含有四価配糖体（(LacNAc)4-DBGs）を合成した。具体的には、アルキル鎖長の異なるジカルボン酸（HOOC-(CH2)n-COOH；n=1, 4, 10, 16）を骨格部に用いることで4種類の(LacNAc)4-DBGsを合成した。続いて、 (LacNAc)4-DBGsとレクチンとの各種相互作用解析を行った。定量沈降試験では、全ての(LacNAc)4-DBGsにおいて架橋複合体の形成が確認された。また、結合親和性は等温滴定カロリメトリーにより評価した。その結果、(LacNAc)4-DBG-C18 が最も強い結合親和性（Kd = 2.4 μM）を示した。具体的には、エンタルピーの値が他の化合物より低いものの、エントロピー損失が最も低いという特徴を有していた。また、化学量論比より (LacNAc)4-DBGsとECAとの結合比は全て1対2であることも明らかとなった。結果として、(LacNAc)4-DBGsの骨格部改変により、ECAとの結合様式を変化させることなくエントロピー損失を軽減し結合親和性を向上させることに成功した。
２）ポリオーマウイルス（MCV）に対する多価性糖鎖リガンドの開発
MCVに対しての結合能が期待される、シアロ糖鎖含有四価糖鎖クラスターとMCVとの架橋複合体形成実験を動的光散乱法により評価した。その結果、ある濃度条件下においてMCVとシアロ糖鎖含有四価糖鎖クラスターは巨大なウイルス‐糖鎖架橋複合体を形成することを明らかにした。
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[Journal Article] Facile synthesis of sulfated sialoglycopolypeptides with a γ-polyglutamic acid backbone as hemagglutinin inhibitors against influenza virus.2014
Author(s)
Ogata, M., Uzawa, H., Hidari, K. I., Suzuki, T., Park, E. Y., Usui, T.
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Journal Title
J. Appl. Glycosci.
Volume: 61
Pages: 1-7
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Expression and purification of bioactive hemagglutinin protein of highly pathogenic avian influenza A (H5N1) in silkworm larvae.2013
Author(s)
Dong, J., Harada, M., Yoshida, S., Kato, Y., Murakawa, A., Ogata, M., Kato, T., Usui, T., Park, E. Y.
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Journal Title
J. Virol. Methods.
Volume: 194
Pages: 271-276
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Sensitive and direct detection of receptor binding specificity of highly pathogenic avian influenza A virus in clinical samples.2013
Author(s)
Takahashi, T., Kawakami, T., Mizuno, T., Minami, A., Uchida, Y., Saito, T., Matsui, S., Ogata, M., Usui, T., Sriwilaijaroen, N., Hiramatsu, H., Suzuki, Y., Suzuki, T.
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 8
Pages: e78125
DOI
Peer Reviewed
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