2013 Fiscal Year Annual Research Report
生体リズム形成における視交叉上核バゾプレッシンニューロンの役割解明と光遺伝学応用
| Project/Area Number |
24790243
|
|---|
| Research Institution | University of Occupational and Environmental Health, Japan |
|---|
Principal Investigator |
丸山 崇 産業医科大学, 医学部, 助教 (20533194)
|
|---|
| Keywords | サーカディアンリズム / バソプレッシン / GABA |
|---|
| Research Abstract |
生体リズムの中枢である視交叉上核におけるバゾプレッシンニューロンの生体リズムへの関与を解明するため、バゾプレッシン-eGFP遺伝子改変ラットを用いた蛍光発現の観察や、パッチクランプ法を用いた電気生理学的性質を検討した。また、光遺伝学を応用し、ハロロドプシン/チャネルロドプシン２遺伝子改変ラットを用いて、光照射による操作によりバゾプレッシンニューロンの活動性やラット行動の変化を観察し、視交叉上核バソプレッシンニューロンの光操作制御法の開発を目的とした。
視交叉上核に存在するバゾプレッシンニューロンの電気生理学的特性を検討するため、バゾプレッシンｰeGFPトランスジェニックラットの視交叉上核ニューロンを急性単離し、緑色蛍光によりバゾプレッシンニューロンを同定した上でホールセルパッチクランプ法により電気生理学的特性を検討した。
その結果、γアミノ酪酸（GABA）に対する電流の変化を電圧固定法により記録したところ、ニューロンの単離を行う時刻によって電流の方向性に相違が認められた。また、これらの反応はGABAレセプターの阻害薬である、picrotoxinにより抑制された。単離タイミングによるGABAへの反応性の違いは、視交叉上核バゾプレッシンニューロンにGABAレセプターを通過する Clイオンの方向性が時刻によって変化していることが示唆された。
光遺伝学を応用した視交叉上核バソプレッシンニューロンの光操作制御法の開発は、ハロロドプシン/チャネルロドプシン２遺伝子改変ラットの作出および飼育繁殖までは完了したが、脳スライスに対して光照射を行い、パッチクランプ法によりニューロンの反応性を確認できるところまでは至っていない。
|
Research Products
(1 results)
