抗ｍｉｃｒｏＲＮＡ１２２療法を基軸とした新規抗Ｃ型肝炎ウイルス治療法の開発

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24790687
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 島上 哲朗 金沢大学, 大学病院, 助教 (50436820)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: C型肝炎ウイルス / マイクロRNA122 / C型慢性肝炎 / 抗ウイルス療法

Outline of Annual Research Achievements

今後C型慢性肝炎に対する治療はDirect-Acting Antiviral Agents (DAAs)耐性ウイルスが問題となる．肝特異的に発現するmicroRNA-122 (miR-122)がHCVの複製に促進的に作用することが報告され，HCV感染チンパンジー(Science 2009)，患者 (NEJM 2013)に対する抗miR-122療法の有用性が報告された．抗miR-122療法は，耐性ウイルスの出現頻度が低いため，今後DAAs耐性ウイルスを予防しうる点で有用な治療法と考えられる．今回，DAAsと抗miR-122併用療法による抗HCV作用機序とその臨床応用の可能性を検討した.
DAAsとしてNS5A阻害剤であるDaclatasvirおよびNS3阻害剤であるSimeprevirを用いた．HCV感染培養細胞に対してDAAs単剤投与したところDAAs耐性ウイルスの出現を認めたが，miR-122に対するアンチセンス鎖による抗miR-122療法の併用によりDAAs耐性ウイルスの出現を認めずにHCVの排除が可能であった．この結果から抗miR-122療法の併用により，DAAs耐性ウイルスの出現を抑制できる可能性が示唆された。
またDacltasvir耐性ウイルスおよびSimeprevir耐性ウイルスを作成し，抗miR-122療法の併用ありとなしの状態でウイルス複製を50%抑制する濃度（EC50）を測定したところ，抗miR-122療法の併用によりEC50の低下を認めた．この結果から抗miR-122療法の併用によりDAAs耐性ウイルスのDAAsに対する薬剤感受性が改善する可能性が示唆された．
さらにインターフェロン誘導遺伝子の一つで，ホストの抗ウイルス作用において重要な役割を果たしているIFIT-1とHCV RNAの相互作用のanti-miR-122投与による変化を免疫沈降法で検討した．その結果anti-miR-122の投与により，IFIT-1とHCV RNAとの相互作用が促進された．この結果から抗miR-122療法は，内因性の抗ウイルスインターフェロンシグナリングを増強している可能性が示唆された．

Research Products

• [Journal Article] Small tRNA-derived RNAs are increased and more abundant than microRNAs in chronic hepatitis B and C. (2015)
  • Author(s): Selitsky SR, Baran-Gale J, Honda M, Yamane D, Masaki T, Fannin EE, Guerra B, Shirasaki T, Shimakami T, Kaneko S, Lanford RE, Lemon SM, Sethupathy P.
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 5 Pages: 7675
  • DOI: 10.1038/srep07675.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Regulation of the hepatitis C virus RNA replicase by (2014)
  • Author(s): Yamane D, McGivern DR, Wauthier E, Yi M, Madden VJ, Welsch C, Antes I, Wen Y, Chugh PE, McGee CE, Widman DG, Misumi I, Bandyopadhyay S, Kim S, Shimakami T, Oikawa T, Whitmire JK, Heise MT, Dittmer DP, Kao CC, Pitson SM, Merrill AH Jr, Reid LM, Lemon SM.
  • Journal Title: Nature Medicine Volume: 20 Pages: 927-35
  • DOI: 10.1038/nm.3610.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Impaired interferon signaling in chronic hepatitis C patients with advanced fibrosis via the transforming growth factor beta signaling pathway. (2014)
  • Author(s): Shirasaki T, Honda M, Shimakami T, Murai K, Shiomoto T, Okada H, Takabatake R, Tokumaru A, Sakai Y, Yamashita T, Lemon SM, Murakami S, Kaneko S.
  • Journal Title: Hepatology Volume: 60 Pages: 1519-30
  • DOI: 10.1002/hep.27277
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The acyclic retinoid Peretinoin inhibits hepatitis C virus replication and infectious virus release in vitro. (2014)
  • Author(s): Shimakami T, Honda M, Shirasaki T, Takabatake R, Liu F, Murai K, Shiomoto T, Funaki M, Yamane D, Murakami S, Lemon SM, Kaneko S.
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 4 Pages: 4688
  • DOI: 10.1038/srep04688.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] hnRNP L and NF90 interact with hepatitis C virus 5'-terminal untranslated RNA and promote efficient replication. (2014)
  • Author(s): Li Y, Masaki T, Shimakami T, Lemon SM.
  • Journal Title: Journal of Virology Volume: 88 Pages: 7199-209
  • DOI: 10.1128/JVI.00225-14.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Regulation of Hepatitis C Virus Infection by Long Non-Coding RNAs. (2014)
  • Author(s): Shimakami T, Honda M, Shirasaki T, Liu F, Funaki M, Murai K, Shiomoto T, Murakami S, and Kaneko S.
  • Organizer: The Liver Meeting 2014(65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease)
  • Place of Presentation: ボストン（アメリカ）
  • Year and Date: 2014-11-13 – 2014-11-17
• [Presentation] Regulation of Hepatitis C Virus Infection by Long Non-Coding RNAs. (2014)
  • Author(s): Shimakami T, Honda M, Shirasaki T, Liu F, Funaki M, Murai K, Shiomoto T, Murakami S, and Kaneko S.
  • Organizer: 21st International Symposium on Hepatitis C Viruses
  • Place of Presentation: バンフ（カナダ）
  • Year and Date: 2014-09-07 – 2014-09-11
• [Presentation] IL28B Genotype，ISGs発現量，前治療反応を用いたテラプレビル併用抗HCV 療法における治療効果予測と至適治療期間に関する検討 (2014)
  • Author(s): 島上哲朗、本多政夫、金子周一
  • Organizer: 第50回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-05-29 – 2014-05-30
• [Presentation] 前治療無効例に対するテラプレビル併用3剤併用療法48週間延長投与に関する検討 (2014)
  • Author(s): 島上哲朗、本多政夫、金子周一
  • Organizer: 第100回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-23 – 2014-04-26
• [Presentation] ACYCLIC RETINOID, PERETINOIN, INHIBITS HEPATITIS C VIRUS REPLICATION AND INFECTIOUS VIRUS RELEASE IN CELL (2014)
  • Author(s): Shimakami T, Honda M, Shirasaki T, Murakami S, and Kaneko S.
  • Organizer: The 49th Meeting of the European Association for the Study of the Liver
  • Place of Presentation: ロンドン（イギリス）
  • Year and Date: 2014-04-09 – 2014-04-13