2012 Fiscal Year Research-status Report
間脳下垂体機能障害による卵巣機能への影響とその分子機序の検討
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24790946
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
中村 絵里 岡山大学, 大学病院, 医員 (30612634)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | 卵巣 / 下垂体 / 生殖内分泌 |
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| Research Abstract |
卵胞の正常な発育は、下垂体FSH/LHと卵胞に発現するFSH/LH受容体シグナルを軸に制御される。プロラクチン(PRL)や成長ホルモン(GH)などの下垂体ホルモン分泌異常では、卵巣機能障害や不妊症などの生殖内分泌機能への影響が認められるが、FSH/LH分泌能の低下とPRL/GHによる直接的な卵胞への影響も示唆される。間脳・下垂体障害をもつ女性では、FSH/LH分泌障害による排卵機能の低下や卵巣ホルモンの低下に加えて、PRL/GHの分泌異常により妊孕能の低下や不妊をきたす。今年度の研究では、下垂体移行性薬剤としてソマトスタチン(SS)アナログによる卵巣機能への影響を検討した。SS受容体(SSTR)のうち、SSTR-2/-5が齧歯動物の卵胞にも発現し、顆粒膜細胞・卵母細胞に分布する。我々は未成熟雌ラットから単離した卵巣顆粒膜細胞の初代培養系において、SOM230とOctreotide（OCT）を用いて、卵胞ステロイド産生への影響について卵胞成長因子BMPとの関係に着目し検討した。SS-analogは、卵母細胞の有無に関わらずFSH誘導性のEstradiol （E2）とProgesterone（P4）の産生を抑制したが、BMP作用を中和する Noggin存在下では、SS-analogによるP4産生とcAMP抑制が減弱することから、SS-analogの作用機序に内因性BMPの関与が示された。SS-analogはBMPの標的遺伝子であるId-1の発現を増強し、BMPの抑制性Smad6/7の発現を減弱することで、卵胞BMPシグナルを増強して卵胞ステロイド産生を制御していると考えられた。今後研究を進め、視床下部・下垂体疾患に伴うPRLとGHの分泌異常と治療が、妊孕性や卵巣機能にどの程度影響を与えるか？治療としてPRL/GHをどの程度抑制すべきか？という問題解決に繋がるものと考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度の計画は、PRLによる生殖内分泌機能への影響の解明であった。ラット初代培養顆粒膜細胞を用いて、各BMPリガンド刺激下におけるPRL受容体シグナル(JAK/STAT、MAPKなど)の変調、BMP受容体システムとしてType-I受容体(ALK-1,2,3,4,5,6,7)、Type-II受容体(ActRIIA, ActRIIB, BMPRII, AMHRII, TβRII)の発現レベルの変化、Smad1/5/8リン酸化シグナルの変化、抑制性Smad6/7発現レベルの変化について評価した。BMPシステム分子の卵胞における発現パターンの変化を追跡し、ステロイド分泌能、BMP/PRL受容体のシグナル連関について探究した。また卵巣細胞を用いた検討により新たに論文として発表することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き、研究計画に従って研究を進めていく。次年度の計画は、GHによる生殖内分泌機能への影響の解明である。特に 卵胞内IGF-I作用とGHに着目した卵胞発育への影響とそのメカニズムの検討を行う。GHによる卵胞での作用を考える上で、GHはその受容体を卵母細胞(oocyte)にも強く発現することから、卵巣の培養細胞を用いるうえで、oocyteの存在を考慮した培養条件を設定する。GH/IGF-IによるBMP-Smadシグナルへの影響をWestern blotとBMP/Smad-reporter assayにより検討する。また、GHの卵胞機能への作用が卵胞に発現するIGF-I作用を介するか否かを検討するために、内因性IGF-Iを中和抗体で抑制してこれらの検討を再評価する。さらに、成熟雌ラットを用いてGH/IGF-Iの抑制モデル(GH受容体拮抗薬投与モデル・IGF-I中和抗体投与モデル)を作成し、排卵への影響・卵胞BMP発現の変化・E2/P4分泌能への影響を評価し、GH/IGF-Iによる生殖内分泌系へのin vivoの影響とBMPシステムとの相互作用について検討する予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
継続研究の実験のための材料・消耗品の他、学会出張に利用する。また実験室の移転のため、使用が若干遅れたために、172,520円の残金が生じたが、今年からはこの残金分を研究材料費に含めて使用する予定である。使用目的としては、実験用動物やプラスチック類（ディッシュ・プレート・チューブ）や核酸実験薬（酵素）、蛋白実験試薬（抗体や酵素類）培養試薬（培地類）の購入に使用する予定とする。
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[Presentation] Effects of BMP-6 on Aldosterone Production by Rat Adrenal Gland In Vivo2012
Author(s)
Miyoshi T, Otsuka F, Matsumoto Y, Inagaki K, Tsukamoto N, Nakamura E, Takano M, Ochi K, Takeda M, Makino H
Organizer
THE ENDOCRINE SOCIETY’S 94th ANNUAL MEETING
Place of Presentation
Houston, TX, USA
Year and Date
20120623-20120626
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[Presentation] Regulatory Role of Melatonin and BMP-4 in Prolactin Secretion by Rat Pituitary Lactotrope Cells2012
Author(s)
Ochi K, Otsuka F, Tsukamoto N, Miyoshi T, Nakamura E, Takeda M, Inagaki K, Ogura T, Iwasaki Y, Makino H
Organizer
THE ENDOCRINE SOCIETY’S 94th ANNUAL MEETING
Place of Presentation
Houston, TX, USA
Year and Date
20120623-20120626
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