2013 Fiscal Year Research-status Report
室内塵中に最も普遍的に存在する微小昆虫・ヒラタチャタテに対する吸入性アレルギー
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24791017
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| Research Institution | Clinical Research Center for Allergy and Rheumatology, National Hospital Organization, Sagamihara National Hospital |
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Principal Investigator |
福冨 友馬 独立行政法人国立病院機構(相模原病院臨床研究センター), 診断・治療薬開発研究室, 室長 (30463110)
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| Keywords | アレルギー・ぜんそく / 昆虫 |
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| Research Abstract |
ヒラタチャタテアレルゲンLip b 1のリコンビナントタンパク作製のために、まず本タンパク質をコードするcDNAの同定を試みた。ヒラタチャタテ虫体よりpoly(A)+RNAを精製し、ヒラタチャタテのcDNAライブラリーを作製した後、イルミナ社シークエンサーを用いて大量塩基配列決定（RNA-seq）を行った。得られた塩基配列情報に基づき構築したcDNA配列から、すでに同定しているLip b 1の部分アミノ酸配列をコードするopen reading frame（ORF）を含むものを検索し、Lip b 1のcDNAを同定した。
次世代シーケンス解析により得られたcDNA配列に基づいてプライマーを設計し、逆転写PCRによりLip b 1のORFを含む領域を増幅した。得られたPCR産物をクローニングし塩基配列を決定した結果、本cDNAは推定２５４アミノ酸から成るタンパク質をコードすることが示された。さらに、これらのcDNAには部分的に塩基が異なる2種類の配列が混在しており、そのうちの１種類については、すでに報告しているLip b 1の２ヶ所の部分アミノ酸配列（それぞれ１２アミノ酸から構成）と完全一致する配列を含むタンパク質をコードすることが明らかとなった。もう一方の配列については、上記の２ヶ所の部分アミノ酸配列のうち２アミノ酸のみ一致しなかったが、両配列間の相同性が極めて高いことから、ともにLip b 1をコードするvaliantのcDNAであると推察された。両valiantがコードするタンパク質について、blastpを用いて相同性検索を行ったところ、唯一コロモジラミ由来のhypothetical proteinのみにともに２２％の類似性でhitした。これより、Lip b 1が新規のタンパク質であることが明らかとなった。現在、Lip b 1の機能に関しても検討を進めているが、バイオインフォマティクス解析の結果、何らかの膜貫通蛋白である可能性が示唆されている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Lip b 1抗体を作製するためにはLip b 1のリコンビナントタンパクの作製が必要となる。現在までにLip b 1をコードする塩基配列は同定されたが、リコンビナントタンパクはまだ得られていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
リコンビナントタンパクが得られ次第、ウサギを免疫しポリクローナル抗体を作製し、それを用いてハウスダストのLip b 1汚染調査を行う。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
研究計画全体がやや遅れているため。
今年度、リコンビナントタンパク作製とポリクローナル抗体作製にコストが必要となる計画です。
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[Journal Article] Oral Mite Anaphylaxis Caused by Mite-Contaminated Okonomiyaki/Pancake-Mix in Japan: 8 Case Reports and a Review of 28 Reported Cases.2014
Author(s)
Takahashi K, Taniguchi M, Fukutomi Y, Sekiya K, Watai K, Mitsui C, Tanimoto H, Oshikata C, Tsuburai T, Tsurikisawa N, Minoguchi K, Nakajima H, Akiyama K.
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Journal Title
Allergol Int.
Volume: 63
Pages: 51-56
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Age-specific characteristics of inpatients with severe asthma exacerbation.2013
Author(s)
Sekiya K, Taniguchi M, Fukutomi Y, Watai K, Minami T, Hayashi H, Ito J, Tanimoto H, Oshikata C, Tsurikisawa N, Tsuburai T, Hasegawa M, Akiyama K.
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Journal Title
Allergol Int
Volume: 62
Pages: 331-336
DOI
Peer Reviewed
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