１０カラーフローサイトメトリーを用いた造血細胞の分化抗原解析と白血病診断法確立

2013 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24791101
• Research Institution: National Research Institute for Child Health and Development
• Principal Investigator: 三春 晶嗣 独立行政法人国立成育医療研究センター, その他部局等, 研究員 (60365319)
• Keywords: 医療・福祉 / 癌 / 生体分子 / 免疫学 / 分類学

Research Abstract

10-カラー解析 Brilliant Violet / FITC / PE / ECD / PC5.5 / PC-7 / APC / APC-AlexaFluor-700 / APC-AlexaFluor750 / KromeOrange の10種の蛍光色素を用いて、正常および腫瘍性の種々の分化段階のT細胞について抗体カクテルCD45 / 7/ 5/ 2/ 1a/ 3/ 4/ 8/ 56/ 99を用いて検討を行ない、分化の過程において、CD5の発現が陰性～強陽性に、逆にCD99の発現が強陽性～弱陽性に変化し、特に腫瘍細胞でその傾向が著しいことから、両者の組み合せによって腫瘍細胞と正常細胞を区別できる可能性が示された。これに、CD4, 8, 1a, 3の発現と、症例に応じて適宜異常発現している抗原を組み合わせることで、ほとんどの症例で微少残存病変（MRD）の検出が可能と考えられた。正常検体に含まれるNK細胞はCD7, 2あるいは5陽性かつCD3陰性であり、未分化型のT細胞性白血病との鑑別が必要となるため、そのマーカーであるとCD56をパネルに加えておく必要性があることが明らかになった。
B前駆/B細胞の分化過程を解析するためのパネルとして、CD45 / 19/ 34/ 10/ 20/ B細胞以外の細胞系統に対する除外用抗体のカクテルを基本として、昨年度はCD58/ 38/ 44/ 45RAのパネルを用いることで約9割の症例でB前駆細胞性白血病細胞と正常のB前駆細胞とを区別可能であることを示した。上記で区別できない白血病症例について検討し、さらにCD72/ 73/ 86/ 200、および CD123/ 133/ 27の2つのパネルを併用する事で、その約半数は白血病細胞を正常細胞から区別可能である事が明らかになり、この3つのパネルと、症例に応じて適宜異常発現している抗原を組み合わせることによりほとんどのB前駆細胞性白血病の症例に対してMRD検出が可能と考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Significance of CD66c expression in childhood acute lymphoblastic leukemia. (2014)
  • Author(s): Kiyokawa N, Iijima K, Tomita O, Miharu M, Hasegawa D, Kobayashi K, Okita H, Kajiwara M, Shimada H, Inukai T, Makimoto A, Fukushima T, Nanmoku T, Koh K, Manabe A, Kikuchi A, Sugita K, Fujimoto J, Hayashi Y, Ohara A.
  • Journal Title: Leuk Res. Volume: 38 Pages: 42-8
  • DOI: 10.1016/j.leukres.2013.10.008.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 小児白血病 MRD検出における10カラーフローサイトメトリーの有用性． (2013)
  • Author(s): 三春晶嗣,清河信敬,小林 健一郎,大喜多肇,飯島一智,森鉄也,斎藤正博,福島敬,康勝好,真部淳,菊地陽,林泰秀,小原明．
  • Journal Title: Cytometry Research Volume: 23 Pages: 7-14
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Nonsense mutation in HLA-B*40:02 in a case with acquired aplastic anaemia: a possible origin of clonal escape from autoimmune insult. (2013)
  • Author(s): Osumi T, Miharu M, Saji H, Kusunoki Y, Kojima H, Nakamura J, Shimada H.
  • Journal Title: Br J Haematol. Volume: 162 Pages: 706-7
  • DOI: 10.1111/bjh.12395.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Effects of insulin-like growth factor-1 on B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia. (2013)
  • Author(s): Yamada H, Iijima K, Tomita O, Taguchi T, Miharu M, Kobayashi K, Okita H, Saito M, Shimizu T, Kiyokawa N.
  • Journal Title: Int J Hematol. Volume: 97 Pages: 73-82
  • DOI: 10.1007/s12185-012-1234-3.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 小児白血病に対するフローサイトメトリーを用いたMRD検出の試み ， (2013)
  • Author(s): 大隅朋生，三春晶嗣，増澤亜紀，山崎文登，弦間友紀，宇野光昭，塩田曜子，寺島慶太，清谷知賀子，木澤洋恵，吉村稔，中澤温子，福島敬，松本公一，清河信敬，森鉄也 ，
  • Organizer: 第55回日本小児血液・がん学会学術集会，
  • Place of Presentation: 福岡
  • Year and Date: 20131129-20131201
• [Presentation] 小児慢性期CMLにおけるフローサイトメトリーを用いた細胞表面マーカー解析の意義. (2013)
  • Author(s): 嶋靖子，清河信敬，谷澤昭彦，三春晶嗣，黒澤秀光，渡辺輝浩，伊藤正樹，遠野千佳子，湯坐有希，堀田紀子，村松秀城，岡田雅彦，梶原良介，後藤裕明，齋藤明子，足立壮一，堀部敬三，水谷修紀，嶋田博之.
  • Organizer: 第55回日本小児血液・がん学会学術集会，
  • Place of Presentation: 福岡
  • Year and Date: 20131129-20131201
• [Presentation] 10カラーフローサイトメトリーによるT-ALLのMRD検出． (2013)
  • Author(s): 三春晶嗣，富田理，石橋武士，清河信敬．
  • Organizer: 第23回日本サイトメトリー学会学術集会，
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20130622-20130623
• [Presentation] Cytomtric Bead Array を用いたBCR-ABL1蛋白検出の臨床的有用性． (2013)
  • Author(s): 富田理，清河信敬，三春晶嗣，石橋武士，大隅朋生，嶋田博之，福島敬，森鉄也，斎藤正博，康勝好，真部淳，菊地陽，林泰秀，小原明．
  • Organizer: 第23回日本サイトメトリー学会学術集会，
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20130622-20130623
• [Presentation] 小児Ph-like ALLのマーカー所見の検討．． (2013)
  • Author(s): 清河信敬，飯島一智，富田理，吉原宏樹，三春晶嗣，大隅朋生，嶋田博之，福島敬，森鉄也，斎藤正博，康勝好，真部淳，菊地陽，林泰秀，小原明．
  • Organizer: 第23回日本サイトメトリー学会学術集会，
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20130622-20130623