眼内血管新生疾患におけるＮｒｆ２の役割

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24791875
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 永井 紀博 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (10327611)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2014-03-31
• Keywords: nrf2 / 網膜

Research Abstract

生活習慣病は今や社会的な問題であり、失明原因の上位を占める眼内血管新生疾患である糖尿病網膜症、加齢黄斑変性など、眼科領域でも注目される疾患を含む。生活習慣病では、その発症前の慢性変化が重要で、疾患予防の観点からは、発症前状態の解析が欠かせない。生活習慣病の原因として、肥満・高脂肪食があるが、肥満・高脂肪食による網膜疾患との関連は、あまり知られていない。そこで、眼内血管新生に至る基礎病態におけるNrf2の解析を行うために、生活習慣病網膜モデルを作成した。
Balb/Cマウスに高脂肪食、コントロール食餌を１ヶ月間投与し、高脂肪食動物モデルを作成した。1ヶ月後の体重、血糖は、高脂肪食群（31.8g, 138 mg/dl）で、コントロール群（27.8g, 103 mg/dl）よりも有意な増加がみられた。また、高脂肪食群では腹腔内の内臓脂肪も増加しており、生活習慣病のモデルと考えられた。血液、網膜におけるアディポネクチンの発現も、高脂肪食群でともに低下していた。
網膜における酸化ストレスをスーパーオキサイド (O2•-)を測定するジハイドロエチジウム (DHE)染色解析法で解析した。網膜におけるDHE染色は高脂肪食群で増加しており、高脂肪食によって網膜における酸化ストレスが増加することが分った。また、nrf2の発現は変化ないものの、下流遺伝子であるho-1の発現低下、gpxの発現上昇がみられた。高脂肪食群ではコントロールに比し網膜電図のa波の有意な低下を示し、視細胞の障害が示唆された。
生活習慣病の基礎病態である高脂肪食負荷によって、網膜におけるNrf2下流遺伝子の発現変化が生じ、酸化ストレスが増大し、アディポサイトカインの発現変化が生じ、網膜電図におけるa波の低下という網膜の機能障害が生じることが明らかになった。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

生活習慣病網膜症のモデルマウスを作成した。生活習慣病の基礎病態である高脂肪食負荷によって、網膜におけるNrf2下流遺伝子の発現変化が生じ、酸化ストレスが増大し、アディポサイトカインの発現変化が生じ、網膜電図におけるa波の低下という網膜の機能障害が生じることが明らかになった。

Strategy for Future Research Activity

Nrf2経路の活性化剤、阻害剤を投与して、網膜電図の変化を解析する。さらに、網膜視細胞のアポトーシス、視物質であるロドプシンの発現変化など、視細胞の形態や機能に与える影響を解析する。
また、視細胞の初代培養系を用いた解析：網膜を単離し、視細胞の初代培養系を作成し、siRNAを使用して、Nrf2経路の視細胞への影響を確かめる。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

消耗品や成果発表のための学会参加費用、論文執筆のための費用に充てる。