腫瘍血管内皮細胞における特異的ｍｉＲＮＡの発現解析

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 24791958
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 秋山 廣輔 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 客員研究員 (10609100)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 腫瘍血管内皮細胞 / miRNA / 血管新生阻害療法

Outline of Annual Research Achievements

これまで癌治療において血管新生阻害療法が開発、実用化されてきた。しかしながら既存の血管新生阻害剤は腫瘍血管に特異性がないため、正常血管をも攻撃し重大な副作用が出てしまうことが報告されている。当教室では腫瘍血管内皮細胞（TEC）は正常血管内皮細胞（NEC）と異なることを報告してきており、申請者らはNECとTECの分子的な違いを標的とする腫瘍血管特異的な新規血管新生阻害剤の開発が可能ではないかと考えた。
申請者らは、正常血管内皮が腫瘍微小環境において異常性を獲得することを報告してきた。そのメカニズムの一つに、腫瘍細胞由来因子によるNECのDNAメチル化や、ヒストン脱アセチル化などエピジェネティックな異常の関与が示唆される。近年、これらエピジェネティックな異常はmicro RNA(miRNA)とよばれる低分子RNAによって制御されることが明らかになりつつある。本研究はNECと比較し、TECに特異的なmiRNAの発現解析を行うとともに、その標的遺伝子の同定および機能解析を行い、腫瘍血管内皮におけるmiRNAを標的とした新規血管新生阻害剤開発と治療応用を展開するための研究基盤の確立が目的である。
これまで、ヒト腎がん臨床検体から血管内皮細胞を分離、培養し、in vitro assayに必要量の血管内皮細胞を確保した。さらにヒトNECおよびヒトTECを用いてmiRNA Micro Array解析し、正常血管内皮細胞に比べ、腫瘍血管内皮細胞で発現が高いmiRNA（miRNA-X）をピックアップし、データベースを用いてターゲット遺伝子を同定した。
H26年度は、腫瘍細胞をヌードマウスに皮下移植し、腫瘍塊から分離してきたマウスTECでもmiRNA-Xの発現が高いことを確認した。さらにこのmiRNA-Xは正常血管内皮細胞の血清飢餓抵抗性や接着能を亢進させ、TEC様の性質を示すことを明らかにした。

Research Products

• [Journal Article] Inhibition of multidrug transporter in tumor endothelial cells enhances antiangiogenic activity (2015)
  • Author(s): Akiyama K., Ohga N., Hida Y., Maishi N., Ohba Y., Alam Mohammad Towfik, Kawamoto T., Ohmura H., Yamada K., Torii C., Shindoh M. and Hida K
  • Journal Title: Am J Pathol Volume: 185 Pages: 572-580
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2014.10.017.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Identification and expression of troponin T, a new marker on the surface of cultured tumor endothelial cells by aptamer ligand (2014)
  • Author(s): Ara MN., Hyodo M., Ohga N., Akiyama K., Hida K., Hida Y., Shinohara N., Harashima H
  • Journal Title: Cancer Med Volume: 3 Pages: 825-834
  • DOI: 10.1002/cam4.260
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Suprabasin as a novel tumor endothelial cell marker (2014)
  • Author(s): Alam Mohammad Towfik，Nagao-Kitamoto H., Ohga N., Akiyama K., Maishi N., Kawamoto T., Shinohara N., Taketomi A., Shindoh M., Hida Y. and Hida K
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 105 Pages: 1533-1540
  • DOI: 10.1111/cas.12549.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Identification of Tumor Endothelial Cells with High Aldehyde Dehydrogenase Activity and a Highly Angiogenic Phenotype, (2014)
  • Author(s): Ohmura-Kakutani H., Akiyama K., Maishi N., Ohga N., Hida Y., Kawamoto T., Iida J., Shindoh M., Tsuchiya K., Shinohara N., Hida K.
  • Journal Title: PLoS ONE Volume: 9 Pages: Open Access
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0113910.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 腫瘍血管内皮細胞のがん転移促進 (2014)
  • Author(s): 2.間石奈湖，大場雄介，秋山廣輔，大賀則孝，浜田淳一，山本和幸，川本泰輔，Alam Mohammad Towfik, 進藤正信，樋田泰浩，樋田京子
  • Organizer: 第1回六甲医学研究会
  • Place of Presentation: 六甲山ホテル（兵庫県神戸市）
  • Year and Date: 2014-11-07 – 2014-11-08
• [Presentation] 腫瘍内低酸素環境と腫瘍血管内皮の異常性の関連 (2014)
  • Author(s): 6.大賀則孝，近藤美也子，秋山廣輔，間石奈湖，北川善政，樋田泰浩，進藤正信，樋田京子
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] CXCR7を標的とした新規血管新生阻害療法の可能性 (2014)
  • Author(s): 5.山田健司，間石奈湖，秋山廣輔，大賀則孝，川本泰輔，進藤正信，高橋典彦，神山俊哉，樋田泰浩，武冨紹信，樋田京子
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] 腫瘍血管内皮細胞によるがん転移促進 (2014)
  • Author(s): 10.間石奈湖, 大場雄介, 秋山廣輔, 大賀則孝, 浜田淳一, 山本和幸, 川本泰輔,進藤正信, 樋田泰浩, 樋田京子
  • Organizer: 第79回日本インターフェロン・サイトカイン学会学術集会
  • Place of Presentation: 北海道大学（北海道札幌市）
  • Year and Date: 2014-06-19 – 2014-06-20
• [Presentation] 口腔扁平上皮癌における新規予後因子としてのVasohibin-1 (2014)
  • Author(s): 13.鳥居ちさほ，大賀則孝，秋山廣輔，間石奈湖，北條敬之,大廣洋一，小野貢伸,戸塚靖則，鄭 漢忠，樋田泰浩，進藤正信，佐藤靖史, 樋田京子
  • Organizer: 第103回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 広島国際会議場（広島県広島市）
  • Year and Date: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [Presentation] 腫瘍血管内皮細胞のがん転移促進 (2014)
  • Author(s): 12.間石奈湖，大場雄介，大賀則孝, 秋山廣輔, 山本和幸，浜田淳一，川本泰輔，Alam Mohammad Towfik, 大村 瞳，進藤正信，樋田泰浩，樋田京子
  • Organizer: 第103回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 広島国際会議場（広島県広島市）
  • Year and Date: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [Presentation] 腫瘍血管における新規血管新生関連因子Biglycan の発現と機能 (2014)
  • Author(s): 11.安永賢史，間石奈湖，秋山廣輔，山本和幸，Alam Mohammad Towfik，大賀則孝，篠原信雄，進藤正信，樋田泰浩，樋田京子
  • Organizer: 第103回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 広島国際会議場（広島県広島市）
  • Year and Date: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [Presentation] Proangiogenic phenotype of Tumor Endothelial Cells induced by ROS accumulation (2014)
  • Author(s): 11.Hojo T., Maishi N., Akiyama K., Ohga N., Kondoh M., Shindoh M., Fujisawa T., Hida Y., Hida K
  • Organizer: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • Place of Presentation: Miyakomesse(Kyoto, Japan)
  • Year and Date: 2014-04-17 – 2014-04-20
• [Presentation] Vasohibin-1 as a novel prognostic factor in oral squamous cell carcinoma (2014)
  • Author(s): Torii C., Ohga N., Akiyama K., Maishi N., Hojo T., Ohiro Y., Ono M., Totsuka Y., Kitagawa Y., Tei K., Hida Y., Shindoh M., Sato Y., Hida K
  • Organizer: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • Place of Presentation: Miyakomesse(Kyoto, Japan)
  • Year and Date: 2014-04-14 – 2014-04-20
• [Presentation] P-gp inhibitor enhanced antiangiogenic activity in metronomic chemotherapy (2014)
  • Author(s): Akiyama K., Ohga N., Hida Y., Maishi N., Alam Mohammad Towfik, Kawamoto T., Omura H., Yamada Y., Torii C., Shindoh M., Ohba Y., Hida K.
  • Organizer: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • Place of Presentation: Miyakomesse(Kyoto, Japan)
  • Year and Date: 2014-04-14 – 2014-04-17
• [Presentation] Tumor endothelial cells promote metastasis (2014)
  • Author(s): Maishi N., Ohba Y., Ohga N., Akiyama K., Hamada J., Yamamoto Y., Kawamoto T., Shindoh M., Hida Y., Hida K
  • Organizer: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • Place of Presentation: Miyakomesse(Kyoto, Japan)
  • Year and Date: 2014-04-14 – 2014-04-17
• [Presentation] SBSN is a novel Tumor Endothelial Cell marker (2014)
  • Author(s): Alam Mohammad Towfik, Nagao H., Ohga N., Akiyama K., Maishi N., Kawamoto T., Shinohara N., Taketomi A., Shindoh M., Hida Y., Hida K
  • Organizer: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • Place of Presentation: Miyakomesse(Kyoto, Japan)
  • Year and Date: 2014-04-14 – 2014-04-17
• [Presentation] CXCL12/CXCR7 axis is important for tumor endothelial cell angiogenic property (2014)
  • Author(s): Yamada K., Maishi N. Ohga N., Akiyama K., Kawamoto T., Alam Mohammad Towfik, Shindoh M. Takahashi N., Kamiyama T., Hida Y., Taketomi A., Hida K.
  • Organizer: The 18th International Vascular Biology Meeting
  • Place of Presentation: Miyakomesse(Kyoto, Japan)
  • Year and Date: 2014-04-14 – 2014-04-17