2014 Fiscal Year Annual Research Report
Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａの細胞侵入に関する病原性の解明
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24791970
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| Research Institution | Tokyo Dental College |
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Principal Investigator |
国分 栄仁 東京歯科大学, 歯学部, 助教 (70453785)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 口腔細菌 / 歯周病原細菌 / Treponema denticola |
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯周病原性菌のひとつであるTreponema denticolaは、Porphyromonas gingivalisおよびTannerella forsythiaとともに慢性歯周炎病巣から高頻度に検出される。T. denticolaの上皮細胞に対する病原性を明らかにするため、病原性遺伝子欠損株を用いてマラッセ上皮遺残細胞に対する細胞間の破綻機構、上皮組織細胞への侵入、免疫機能に関して動的な病態代謝過程における変化の検討を行った。
ブタ由来マラッセ上皮遺残細胞を培養後、T. denticola ATCC 35405 (野性株)、表層プロテアーゼ (prtP)またはMajor outer sheath protein (msp)欠損株をそれぞれMOI 1:100の割合で感染させた。細胞は走査型電子顕微鏡 (SEM)にて侵入の観察、および共焦点レーザー顕微鏡を用いた蛍光抗体法によりInterleukin (IL) -2、IL-6、HSP70タンパク発現を観察し、Western blotting法にてタンパク質の発現を確認した。また、感染後に細胞からmRNAを採取し、RT-PCR法にてIL-1およびIL-6、heat shock protein 70 (HSP70)の発現量を定量した。
感染30分後から侵入を示唆する像を認め、蛍光抗体法およびmRNA発現量の解析結果では、IL-1発現は野性株での減少が認められた。IL-6発現量は野性株の感染後1時間でピークを示し、HSP70は感染後3時間から増加した。prtPおよびMsp欠損株共にHSP70 mRNA発現は減少した。 T. denticolaは感染により上皮細胞のストレスタンパクおよびサイトカイン産生を引き起こし、そのプロセスにMspおよびPrtPが関与する事が示唆された。
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