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2014 Fiscal Year Annual Research Report

未成熟分泌顆粒の酸性pH維持に伴う陰イオン流入はアクアポリン6が行うか?

Research Project

Project/Area Number 24791986
Research InstitutionShowa University

Principal Investigator

福島 美和子  昭和大学, 歯学部, 助教 (90548273)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywords唾液腺 / 分泌顆粒 / 酸性オルガネラ / 遺伝子サイレンシング / 融合タンパク質
Outline of Annual Research Achievements

耳下腺の分泌顆粒は未成熟な時期があり、内部は酸性に維持されている。申請者は酸感受性・陰イオン透過性のアクアポリン6(AQP6)が耳下腺分泌顆粒膜上に存在することを発見し、酸存在下で陰イオン流入を行うと考えた。前年度までの結果より、1.ラット耳下腺初代培養細胞内での未成熟分泌顆粒の検出方法の改善、2.GFP蛍光タンパク質とAQP6遺伝子を用いた融合タンパク質の作製、3.shRNAを用いたAQP6遺伝子サイレンシングがラット耳下腺初代培養細胞内での未成熟分泌顆粒の形成と機能に与える影響の検討を行った。1.についてはラベリング量を変えても未成熟分泌顆粒と思われる顆粒の検出には至らず、別の検出方法を検討する必要が生じた。2.は融合タンパク質を作製したが、細胞内で予想される局在と機能を見いだせなかったことから、融合方法の再検討が必要と考えられた。3.についてはshRNA核酸とアデノウイルスベクターのライゲーションを準備しており、shRNAの効果については2.の問題を修正後に検討予定である。
以上の結果より、ラット耳下腺初代培養細胞内においては未成熟分泌顆粒の可視化をpHを指標に行うことは困難である可能性が見出された。また、AQP6遺伝子サイレンシングが唾液腺分泌顆粒に与える効果については助成終了後も研究を独自に継続し、結果の公表を行う必要があると考えた。

  • Research Products

    (1 results)

All 2014

All Presentation (1 results)

  • [Presentation] ラット耳下腺分泌顆粒に特異的なpHインジケーターの合成と応用2014

    • Author(s)
      福島美和子、加藤治、横山愛、美島健二、吉垣純子
    • Organizer
      第59回日本唾液腺学会
    • Place of Presentation
      東京、文京区
    • Year and Date
      2014-12-06 – 2014-12-06

URL: 

Published: 2016-06-01  

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