ミトコンドリアをターゲットとした口腔癌新規治療法の開発

2012 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 24792209
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 長谷川 巧実 神戸大学, 医学部附属病院, 医員 (50546497)
• Project Period (FY): 2012-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 口腔癌 / 炭酸ガス

Research Abstract

本研究においては、癌細胞に対し局所的炭酸ガス投与を行い、細胞内ミトコンドリア量を増加させ、ミトコンドリアのアポトーシス経路を活性化させることにより、癌細胞のアポトーシスへの誘導を証明、解析することを目的とした。
in vitroでの検討を開始し、現在、解析中である。
in vivoでの検討で、ヒト口腔扁平上皮癌由来細胞（HSC-3）を継代培養し、Nude Mouse背部に皮下移植した。CO2実験群とコントロール群に分け、開発したCO2吸収ゲルとCO2投与装置を用いて、週2回、投与時間20分で経皮的CO2投与を開始、移植28日後まで各回の腫瘍体積を評価した。実験終了後、腫瘍を採取した。採取した組織よりRNA、タンパク質抽出を行い、Real-time PCR法、Western blot法を用いて、ミトコンドリア経路のアポトーシスの解析、転移抑制効果の解析を行った。また凍結組織切片を作製し、組織学的解析として、各染色を行った。
コントロール群と比較し、炭酸ガス投与群において、腫瘍体積の増殖抑制効果が認められ、ミトコンドリア経路のアポトーシス関連因子の上昇、転移抑制因子の減少を認めており、解析中である。また腋下リンパ節の転移数減少が認められた。
in vivoにおける炭酸ガス投与による、ミトコンドリア経路を介した癌細胞の増殖抑制ならびに転移抑制効果が証明されつつある。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

in vitroでの研究は現在、進行中、解析中であるが、
in vivoの実験では、上記に示したように、すでに腫瘍抑制効果が示されつつあり、おおむね順調に進展している。

Strategy for Future Research Activity

引き続き、研究計画書に沿って、研究を推進していきたい。
特に、現在、示されつつあるin vivoのデータの解析完了と、扁平上皮癌以外の細胞での検討をすすめていきたい。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

消耗品費として、実験試薬および器具は、樹立癌細胞培養、遺伝子、蛋白実験、組織標本作成、染色、免疫組織染色のために使用する。実験動物費は、ヌードマウス購入費である。
国内旅費として口腔外科ならびに生化学関連学会出席の学会出張費として使用する。
謝金として国際雑誌にて研究成果発表における校閲のために使用する。
その他として実験動物の飼育費、研究成果を論文にて発表時に必要な印刷および投稿のために使用する。