2013 Fiscal Year Research-status Report
Project/Area Number |
24792250
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Research Institution | Iwate Medical University |
Principal Investigator |
松本 直子 岩手医科大学, 歯学部, 助教 (50436630)
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Keywords | S.anginosus / AID / 口腔癌 |
Research Abstract |
本研究はこれまで食道癌、頭頸部扁平上皮癌組織において高頻度に検出が報告されているStreptococcus anginosus ( S.anginosus )についての口腔癌組織検体における感染についての検討を行うと共にHelicobacter pyloriが感染した胃癌組織での異常発現を認め,癌関連遺伝子変異を誘導することが示唆されている Activation-induced cytidine deaminase(AID)について口腔癌組織中のAID発現および S.anginosus感染による口腔粘膜上皮でのAID発現誘導について検討し、細菌性生物発癌におけるAID異所性発現の特異性とS.anginosusの病原性との関連性について明らかにすることで、S.anginosusの口腔癌発生機序の解明を目的とするものである。 初年度(平成24年度)は当科において同意の得られた口腔癌切除組織検体における ①ゲノムDNA抽出、②PCRによるS.anginosusの検出、③RT-PCRによるAID発現ついて解析を行った。平成25年度は平成24年度に引き続きは口腔癌切除組織検体数を更に追加し、上記①~③のついての解析を行った。更に、ヒト歯肉上皮細胞株を用いてS.anginosus刺激により培養した試料についてのAID発現誘導についてRT-PCRを行い、複数のAID抗体を使用しウエスタンブロットにて解析を行った。今後更にAID抗体を用いて培養細胞での免疫組織染色を行いAID発現解析を行う予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
初年度はpilot studyによる受験系の確立に時間を要し、口腔癌切除癌組織検体での①ゲノムDNA抽出、②PCRによるS.anginosusの検出、③RT-PCRによるAID発現ついての解析について開始が遅れたが、実験系確立後は現在まで順調に経過し18検体行った。又、平成25年度に実施計画であった、ヒト歯肉上皮細胞株を用いてS.anginosus感染についてのAID発現誘導についてもAID抗体を使用したウエスタンブロットを開始することが出来た。
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Strategy for Future Research Activity |
平成24、25年度に引き続き切除口腔癌組織における①ゲノムDNA抽出、②PCRによるS.anginosusの検出、③RT-PCRによるAID発現ついての解析は検体数を増やし行う予定である。又、平成25年度より開始しているヒト歯肉上皮株のS.anginosusu感染によるAID発現誘導についても引き続きウエスタンブロットによる解析も継続し、今後更にAID抗体を用いて培養細胞での免疫組織染色を行いAID発現解析を行う予定である。
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Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
初年度設備備品として申請していた、リアルタイムPCRシステムは現在まで岩手医科大学分子生物学講座(木村重信教授)にて研究の助言を含め、使用させて頂いている。同申請分経費は本研究に必要な複数のAID抗体、ウェスタンブロット、免疫組織試薬として継続的な消耗品の購入に使用している。平成26年度さらに検体数を増やす予定であり、PCR及び、ウェスタンブロット等の消耗品に使用予定である。 平成26年度は切除癌組織の検体数を更に増やし、①ゲノムDNA抽出、②PCRによるS.anginosusの検出、③RT-PCRによるAID発現ついての解析を行い、又ヒト歯肉上皮細胞株を用いてS.anginosus刺激により培養した試料についてのAID発現誘導についてRT-PCRを行い、複数のAID抗体を使用しウエスタンブロットにて解析を行った。今年度はこれに加え免疫組織染色を行いAID発現解析を行う予定であるのでこれら実験系の消耗品、又論文作成、投稿費等に使用する予定である。
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Research Products
(1 results)