2013 Fiscal Year Annual Research Report
長鎖非コードＲＮＡを介する転写抑制でのＲＮＡ結合タンパク質のメチル化修飾の役割
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24810023
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| Research Institution | Saitama Medical University |
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Principal Investigator |
藤本 健太 埼玉医科大学, 医学部, 助教 (50403580)
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| Project Period (FY) |
2012-08-31 – 2014-03-31
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| Keywords | 長鎖非コードRNA / メチル化 / RNA結合タンパク質 |
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| Research Abstract |
本研究は、長鎖非コードRNA依存性の転写制御機構を解明することを目的とする。タンパク質をコードしない長鎖非コードRNAがここ数年数多く報告されているが、その生理的機能や作用機構は未だに解明な部分が多い。我々は、DNA損傷刺激によるcyclin D1遺伝子の転写抑制が、cyclin D1プロモーターから転写される長鎖非コードRNA (pncRNA) がRNA結合タンパク質TLS (Translocated in LipoSarcoma) と結合することにより、誘導されることを見出した。本研究では、長鎖非コードRNAがTLSを介してどのように転写を抑制するのかを明らかにすることを目的とする。本年度の研究計画は、in vivoにおけるアルギニンメチル化修飾を受けたTLSの転写調節における機能解析である。
我々は、メチル化修飾を受けるTLSのアルギニン残基(R216/R218)を報告した。そこで、TLSのアルギニン特異的なメチル化修飾の生理機能を明らかにするために、アルギニンメチル化TLSを特異的に認識するモノクローナル抗体を作製した。まず、この抗体がアルギニンメチル化TLSを特異的に免疫沈降し、RNA免疫沈降(RIP)アッセイに用いることができることを確認した。次に、HeLa細胞において、メチル化TLS抗体を用いた免疫沈降法およびRIPアッセイにより、内在性のTLSがメチル化されていること、cyclin D1プロモーター由来のpncRNAがアルギニンメチル化TLSに結合していることを明らかにした。現在、メチルTLSによる発現制御機能を調べるために、アルギニンメチル化TLSに結合する因子の同定を試みている。これらの研究成果により、今後、アルギニンメチル化修飾を受けたTLSを介した長鎖非コードRNA依存性の発現制御機構を明らかにする予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(5 results)
