2013 Fiscal Year Annual Research Report
ポリオウイルスの組織特異的増殖を制御するＩＲＥＳ依存的な翻訳機構の解明
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24870032
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| Research Institution | Microbial Chemistry Research Foundation |
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Principal Investigator |
佐藤 亮介 公益財団法人微生物化学研究会, 微生物化学研究所, 博士研究員 (00635592)
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| Project Period (FY) |
2012-08-31 – 2014-03-31
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| Keywords | IRES / 翻訳開始機構 / ポリオウイルス / 組織特異性 / 宿主因子 |
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| Research Abstract |
本研究は、ポリオウイルスのIRES依存的翻訳開始機構を制御する宿主因子を同定し、機能解析を行うことで、ポリオウイルスの組織特異性に寄与するIRES依存的翻訳開始機構の素過程を解明することを最終目的とする。神経特異的に存在すると考えられるポリオウイルスIRESの宿主因子を、効率的かつ網羅的に同定するためには、複数の手段でアプローチすることが最も有効な手段であると考えられる。本年度は、昨年度に確立した生化学的・分析化学的なスクリーニング系を駆使し、神経細胞特異的に発現・機能している宿主因子の候補をいくつか同定した。
１．ポリオウイルスの強毒株と弱毒株の差異を利用し、強毒株由来のIRES依存的翻訳に必要な宿主因子について、in vitro翻訳系を用いた同定を試みた。
２．非神経細胞（HeLa）と神経細胞（SK-N-SH）の細胞抽出液を用いたin vitro翻訳系を駆使し、神経特異的宿主因子の同定を試みた。
３．RNA pull-down法により、強毒株由来IRES mRNAに特異的に結合する神経特異的宿主因子の同定を試みた。
４．シグナル伝達分子のsiRNAライブラリを用いたハイスループットスクリーニングにより、IRES依存的な翻訳開始に関わるKinaseやPhosphataseの同定を試みた。
最終的に、上記スクリーニングにより同定した宿主因子群が、真の神経特異的宿主因子であるのかについて、ポリオウイルス感染神経細胞（SK-N-SH）の細胞抽出液を用いたin vitro翻訳系により再評価した。絞り込んだ宿主因子がIRESのどの領域に結合するのかについて、生化学的アプローチにより評価した。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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