2013 Fiscal Year Annual Research Report
視神経脊髄炎における補体介在性・非介在性アストロサイト傷害の解明
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24890017
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
西山 修平 東北大学, 大学病院, 医員 (60636017)
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| Project Period (FY) |
2012-08-31 – 2014-03-31
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| Keywords | 視神経脊髄炎 / アストロサイト / 補体介在性傷害 |
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| Research Abstract |
本研究における目的は、視神経脊髄炎(NMO)が炎症性アストロサイト傷害という疾患概念であることを確立し、その発症機序において補体介在性傷害、補体非介在性傷害それぞれによる抗アクアポリン4(AQP4)抗体の関与を明らかにすることである。
本年度は、1.NMO患者血清抽出IgGを用いたアストロサイト傷害性の検討、および2.蛍光タンパクとのリコンビナントAQP4を使用したアストロサイトでの形態学的検討を計画した。
1.については、NMO患者5名の再発時の血漿からIgG(NMO-IgG)を抽出する。このNMO-IgGのヒトアストロサイト一次培養細胞に対する影響を、蛍光免疫染色法を用い補体非依存性の形態的変化・細胞傷害の有無を検討する。培養液中の細胞死関連タンパクや各種サイトカインの測定を行い、病態の促進・抑制因子の解明を目指す。またNMO-IgG作用下さらにヒト補体を添加し、補体依存性細胞傷害による細胞死が生じるかを検討する。
2.については 蛍光タンパクとのリコンビナントAQP4を用い、ヒトアストロサイト一次培養細胞に導入して発光AQP4を細胞膜上に発現するモデルを用いる。このモデルに対して、培養液中にNMO-IgGを添加し細胞膜上のAQP4の発現変化を膜染色やチュブリン染色を用い検討する。
さらに、ヒ素化合物をNMO-IgG添加前に加え、膜状AQP4の経時的変化について観察、検討を行う。NMO-IgG添加から2時間経過後、培養液中からNMO-IgGを取り除き、アストロサイト膜状AQP4がどのように回復するかその過程も経時的に観察しそのメカニズムを解析する。同様の検討を正常コントロール群や多発性硬化症患者群でも行い、上記の変化がNMO-IgGのみで引き起こされることを確認する。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(6 results)
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[Presentation] A multicenter, cross-sectional study of the usefulness of CSF-GFAP in the diagnosis and the prognosis of inflammatory CNS diseases.2013
Author(s)
S. Nishiyama, T. Misu, Y. Simizu, K. Yokoyama, T. Kageyama, Y. Takai, R. Takano, T. Takahashi, J. Fujimori, S. Sato, I. Nakashima, Y. Itoyama, K. Fujihara, M. Aoki
Organizer
PACTRIMS 2013
Place of Presentation
京都
Year and Date
20131106-20131108
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[Presentation] A multicentric cross-sectional study of the usefulness of cerebrospinal fluid-glial fibrillary acidic protein (CSF-GFAP) in the diagnosis and prognosis of inflammatory demyelinating diseases2013
Author(s)
S. Nishiyama, T. Misu, Y. Simizu, K. Yokoyama, T. Kageyama, Y. Takai, R. Takano, T. Takahashi, J. Fujimori, S. Sato, I. Nakashima, Y. Itoyama, K. Fujihara, M. Aoki
Organizer
29th ECTRIMS
Place of Presentation
デンマーク・コペンハーゲン
Year and Date
20131002-20131005
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