2013 Fiscal Year Annual Research Report
脱メチル化酵素ＡＩＤによる慢性ウイルス感染再活性化の検討
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24890075
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
若江 亨祥 金沢大学, 医学系, 助教 (70638303)
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| Project Period (FY) |
2012-08-31 – 2014-03-31
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| Keywords | AID/APOBEC / HBV / 脱メチル化 / 慢性感染 / B型肝炎再活性化 |
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| Research Abstract |
本研究はAID/APOBECのヒトB型肝炎ウイルス(HBV) のcovalently-closed-circular DNA (cccDNA) に対するDNA脱メチル化活性の検討を目的とした。cccDNAの検出にあたり、サザンブロット法にかわり環状DNAを特異的に増幅するRolling Circular Ampification (RCA)を立ち上げ、実際にHBV全長ゲノムが挿入されたヒト肝細胞株から検出できる事を確認した。
ヒトB型肝炎ウイルスの代替モデルとして、より1細胞あたりのcccDNAコピー数の多いDuck Hepatitis B Virus (DHBV)ゲノムを安定発現したニワトリ肝細胞株を用いた。cccDNA選択的バイサルファイトPCR法を用いて評価した結果、APOBEC3Gの異所性発現によりメチル化の減少を認め、APOBEC3がcccDNAのメチル化を抑制している事が示唆された。
AID/APOBECがHBVゲノムを脱メチル化するという作業仮説をヒトパピローマウイルス(HPV)にも演繹した。持続感染が成立した子宮頸部及び皮膚の基底細胞では、HPVゲノムはHBV同様環状二本鎖DNAとして存在する。HPV16陽性細胞株であるW12を用いてAPOBEC3A及び3Gを強制発現したところ、Long Control Region(LCR)のメチル化の低下を認めた。HBVと同様にAPOBEC3がHPVゲノムのメチル化を抑制している可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(4 results)
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[Presentation] APOBEC3 hypermutates human papillomavirus (HPV) 16 genome2013
Author(s)
Kousho Wakae, Satoru Aoyama, Wang Zhe, Liu Guangyan, Ahsan Monjurul, Mieko Imayasu, Miki Koura, Kouichi Kitamura, Mitsuhiro Nakamura, Satoru Kyo, Satoru Kondo, Tomokazu Yoshizaki, Iwao Kukinmoto, Tomoaki Nishiyama, Masamichi Muramatsu
Organizer
第36回日本分子生物学会年会
Place of Presentation
神戸国際会議場・神戸国際展示場・神戸ポートピアホテル
Year and Date
20131203-20131206
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[Presentation] APOBEC3はHPVゲノムに hypermutationを導入する2013
Author(s)
若江 亨祥, 青山 慧, 王 哲, 喜多村 晃一, 劉 光炎, アハサン=モハメド=モンジュルル, 中村 充宏, 京 哲, 柊元 巌, 西山 智明, 村松 正道
Organizer
NGS現場の会・第三回研究会
Place of Presentation
神戸国際会議場
Year and Date
20130904-20130905
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