2015 Fiscal Year Annual Research Report
進化分子工学を基盤とする分子標的化合物の新しい設計法
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25242068
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| Research Institution | Osaka Prefecture University |
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Principal Investigator |
藤井 郁雄 大阪府立大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (70189984)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
円谷 健 大阪府立大学, 理学(系)研究科(研究院), 准教授 (00372855)
藤原 大佑 大阪府立大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (30611420)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 生体分子 / 医療・福祉福祉 / ナノバイオ / 蛋白質 / 有機化学 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究目的：進化分子工学（細胞表層ディスプレイ技術）とペプチド構造構築理論を組み合わせることにより，分子標的化合物の新しい設計法を開発する。すなわち，ヘリックス構造をもつペプチドのライブラリーを構築し，標的タンパク質に結合するペプチド（マイクロ抗体と呼ぶ）をスクリーニングする。得られるヘリックスペプチドの結合活性アミノ酸の立体構造情報をもとに分子標的化合物を設計する。
研究計画・方法：本研究では，４つの戦略で分子標的化合物の作製技術を検討する。①試験管内進化によるマイクロ抗体の開発，②立体構造情報に基づくマイクロ抗体の開発，③親和性，生物活性，生体内での安定性，膜透過性，体内動態，抗原性， ④分子標的低分子化合物の設計と合成および生物活性
平成27年度の研究実績概要：当該年度は，③親和性，生物活性，生体内での安定性，膜透過性，体内動態，抗原性に関しては，抗G-CSFマイクロ抗体をマウスに免疫し，マイクロ抗体に抗原性がないことを証明した。抗VEGFマイクロ抗体について酵素分解に対する安定性を評価した。さらに，ヒト臍帯静脈内皮細胞に対する増殖阻害活性を確認するとともに，担がんマウスを用いた動物実験を実施し，がん細胞増殖阻害活性を見いだした。p53様マイクロ抗体について，ポリアルギニン配列を導入し，細胞内移行を確認するとともに細胞増殖阻害活性を評価した。④分子標的低分子化合物の設計と合成および生物活性に関しては，G-CSF受容体結合マイクロ抗体について，ヘリックス上の結合活性アミノ酸３残基 (Leu28, Lys29, Glu32)に対応する官能基を低分子の土台分子に導入したビフェニル誘導体を合成し，G-CSF受容体への結合活性を決定した。さらに，結合活性アミノ酸４残基（Leu28,Glu32 Arg35,Tyr36 ）に対応する官能基を導入したビフェニル誘導体を合成中である。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Development of an ultrasensitive immunoassay using affinity maturated antibodies for the measurement of rodent insulin2015
Author(s)
Sunao Imai, Shoichi Naito, Tatsuya Takahashi, Akira Yamauchi, Etsuo Nakamura, Masaaki Sato, Yuuichi Mitsuda, Hiroyuki Takagi, Yoshito Numata, Ikuo Fujii, Shoji Yamane
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Journal Title
Analytical Biochemistry
Volume: 473
Pages: 72-79
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Development of a novel immunoassay specific for mouse intact proinsulin2015
Author(s)
Sunao Imai, Tatsuya Takahashi, Shoichi Naito, Akira Yamauchi, Chihiro Okada, Yoshihide Notsu, Ikue Sakikawa, Michiyoshi Hatanaka, Takanori Iwasaki, Atsushi Morita, Ikuo Fujii, Shoji Yamane
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Journal Title
Analytical Biochemistry
Volume: 484
Pages: 91-98
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] The cyclized helix-loop-helix peptide as a molecular scaffold for the design of intracellular protein-protein interaction inhibitors2015
Author(s)
Daisuke Fujiwara, Hidekazu Kitada, Masahiro Oguri, Toshio Nishihara, Masataka Michigami, Kazunori Shiraishi, Eiji Yuba, Ikuhiko Nakase, Seiji Kodama, Kenji Kono, Sihyun Ham, Ikuo Fujii
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Journal Title
Peptide Science
Volume: 2015
Pages: 85-86
Peer Reviewed
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[Presentation] CYCLIZED HELIX-LOOP-HELIX PEPTIDE AS A MOLECULAR SCAFFOLD FOR THE DESIGN OF INTRACELLULAR PROTEIN-PROTEIN INTERACTION INHIBITORS2015
Author(s)
Daisuke Fujiwara, Hidekazu Kitada, Masahiro Oguri, Toshio Nishihara, Masataka Michigami, Kazunori Shiraishi, Eiji Yub, Ikuhiko Nakase, Seiji Kodama, Kenji Kono, Sihyun Ham, and Ikuo Fujii
Organizer
第52回ペプチド討論会
Place of Presentation
平塚市中央公民館, 神奈川県
Year and Date
2015-11-16 – 2015-11-18
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