2015 Fiscal Year Annual Research Report
ケミカルバイオロジーを利用したヒトヌクレオチド除去修復機構の解析
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25281017
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
松永 司 金沢大学, 薬学系, 教授 (60192340)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
猪部 学 金沢大学, 薬学系, 准教授 (10312414)
若杉 光生 金沢大学, 薬学系, 助教 (80345595)
国嶋 崇隆 金沢大学, 薬学系, 教授 (10214975)
後藤 享子 金沢大学, 薬学系, 准教授 (50180245)
小田 彰史 金沢大学, 薬学系, 准教授 (50433511)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ケミカルバイオロジー / 化合物ライブラリー / スクリーニング / ヌクレオチド除去修復 / 阻害剤 / 低分子化合物 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
A. 新規NER阻害物質の探索と同定
東大創薬オープンイノベーションセンターのコアライブラリー9,600化合物のスクリーニングより得たヒット化合物（12種）について、より信頼性の高いNER評価系であるELISAを用いてNER阻害活性の検証を行った。このアッセイでは、相当量の化合物が必要なため、商業ベースで手に入るものは購入し、入らないものは研究協力者の後藤氏に合成を依頼した。その結果、入手できた化合物の中で、新たに1種で弱いNER阻害活性を検出した。このNER阻害化合物は、6-4PPよりもCPDに対して修復阻害を示す可能性があり、詳細な解析を進めている。
B. NER阻害物質NERiKU001の解析
NERiKU001 (A6) によって誘導されるERCC1の分解誘導に関与するユビキチン・プロテアソーム系因子を同定する目的で、siRNAライブラリーを用いたスクリーニングを行ったところ、ノックダウンによりERCC1のA6誘導分解が抑制される２種の因子を見出した。これがNERiKU001 (A6) の直接的な標的である可能性について検討を行っている。
一方、文献（Alekseev et al., 2014）で報告されたスピロノラクトンがXPBを分解誘導する反応系と、NERiKU001 (A6) によるERCC1分解誘導系を詳細に比較した結果、両化合物によるNER因子の分解誘導は各々XPBとERCC1に特異的であり、その動態はスピロノラクトンによるXPB分解誘導の方が速やかでより長く持続することがわかった。また、両者を中濃度域で併用すると、各々の単独時より強い阻害活性を示すことが明らかになった。以上の結果より、複数のNER因子で細胞内レベルを調節する仕組みが存在することがわかり、両化合物はこの仕組みの解明やNERのメカニズム解析に有用であることが示された。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(8 results)
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[Presentation] A small molecule inhibitor of nucleotide excision repair from chemical library screening using a newly developed cell-based immunoassay2015
Author(s)
Nishinaga, M., Miyazaki, K., Takamori, C., Ohzawa, T., Wakasugi, M., Saito, T., Osada, H. and Matsunaga, T.
Organizer
The 15th International Congress of Radiation Research
Place of Presentation
国立京都国際会館
Year and Date
2015-05-25 – 2015-05-29
Int'l Joint Research
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[Presentation] Activation of ATR and ATM signaling pathways by NER-dependent secondary damage in mammalian quiescent cells2015
Author(s)
Wakasugi, M., Sasaki, T., Matsumoto, M., Nagaoka, M., Inoue, K., Inobe, M., Horibata, K., Tanaka, K. and Matsunaga, T.
Organizer
The 15th International Congress of Radiation Research
Place of Presentation
国立京都国際会館
Year and Date
2015-05-25 – 2015-05-29
Int'l Joint Research
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