2018 Fiscal Year Annual Research Report
Site-specific gene mutagenesis involving a single DNA adduct in vivo
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25281022
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| Research Institution | National Institute of Health Sciences |
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Principal Investigator |
安井 学 国立医薬品食品衛生研究所, 変異遺伝部, 室長 (50435707)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々 彰 千葉大学, 大学院理学研究院, 特任助教 (10738347)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | DNA付加体 / DNA損傷 / 二本鎖切断 / 遺伝子変異 / １分子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
直接的な相同組み換え修復（HR）の無いX染色体上に位置するヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ（HPRT）遺伝子座、一方、HRを有する17番常染色体上に位置するチミジンキナーゼ（TK）遺伝子座の２つに注目し、それぞれの遺伝子座に１ヶ所だけDNA二本鎖切断（ISceI制限酵素による切断）を形成させ，そこで起きる塩基の変異や欠失を詳細に調べた。得られた突然変異プロファイルは，両遺伝子座ともに塩基変異はほとんど観察されず、欠失変異が占めていた。TK座の欠失変異を持つクローン細胞はわずか0.9%であったが、HPRT座のそれは7.4%もあり、それは二本鎖切断部位の近傍18bp以内で起きる欠失変異が多いことが原因であった。また、HPRT座だけで200bpsを超える大きな欠失（0.7%）が誘発することが分かった。二本鎖切断が1ヶ所あるだけで、X染色体上のHPRT座は、TK座よりも約8倍高く遺伝子変異が起きることが分かった。なお本実験で使用された条件は、ISceI制限酵素による人工的に起こした二本鎖切断を利用しているため、通常の生理的条件で起きる二本鎖切断によるDNA修復蛋白質等の誘導とは異なる可能性がある。
本研究で構築した遺伝子破壊細胞は、国衛研や京都大学などで組織されたTK6細胞ミュータントコンソーシアム（http://www.nihs.go.jp/dgm/tk6.html）で世界中に分与され、共同研究に用いられている。
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| Research Progress Status |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(8 results)
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[Presentation] リボヌクレオチドが誘発する奇異突然変異とその防御機構2018
Author(s)
佐々 彰, 安井 学, 竹石歩奈, 原田佳歩, 鈴木 慈, 津田雅貴, 笹沼博之, 武田俊一, 菅澤 薫, 本間正充, 浦 聖恵
Organizer
日本遺伝学会
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