2015 Fiscal Year Annual Research Report
生体機能材料としての羊膜と羊膜を新規治療デバイスとして用いた臨床応用
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25282143
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
二階堂 敏雄 富山大学, 事務局, 理事 副学長 (50180568)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 淑子 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 准教授 (00171421)
相古 千加 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 助教 (10523889)
岡部 素典 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 助教 (60283066)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 羊膜細胞 / 乾燥羊膜 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
患者よりインフォームドコンセントを得て、胎盤組織から羊膜を採取し、トリプシン処理により上皮細胞（HAE)、コラゲナーゼ処理により間葉系細胞（HAM)を分離、回収した。また、このようにして採取したHAE、HAMに遺伝子を導入し、不死化羊膜上皮細胞（iHAE）、不死化羊膜間葉系細胞(iHAM)を樹立している。これらの細胞を培養し、以下の実験に用いた。胚性幹細胞や誘導型多能性幹細胞（iPS 細胞）の培養にはfeeder細胞を用いることが一般的であるが、作業の煩雑さやコンタミネーションの懸念からfeeder free培養系の確立が求められている。lamininコートした培養皿でHAEを培養したところ、cluster様の細胞塊が形成されることが観察された。通常の接着状態で培養されたHAEは幹細胞関連因子Oct3/4は核、細胞質の両方に局在するが、この細胞塊では核のみに局在し、幹細胞としての性質をより強く示した。また、iHAEにPdx1,MafAなどの膵関連因子を導入し膵細胞への分化を誘導した。Pdx1導入後培養2か月、3か月にインスリンの発現が転写レベルで検出され、インスリン産生が誘導されたことが示された。streptzotosinを投与により作製した糖尿病モデルマウスにこのPdx1導入HAEを移植し、血糖値の抑制が観察された。SCID関節炎モデルを作成しHAMを移植することにより、関節炎の治癒効果があることを示した。羊膜細胞の免疫抑制効果をin vivoで示すものである。
我々がこれまでに開発したハイパードライ乾燥羊膜を眼科、脳神経外科、耳鼻咽喉科、歯科口腔外科の多領域において治療に用い、自家組織や人工素材を用いた治療と比較して有用であった。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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