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2013 Fiscal Year Annual Research Report

電気化学を用いた三次元細胞組織の構築

Research Project

Project/Area Number 25289291
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Research InstitutionYokohama National University

Principal Investigator

福田 淳二  横浜国立大学, 工学研究院, 准教授 (80431675)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 王 碧昭  筑波大学, 生命環境科学研究科(系), 教授 (80261775)
渡邉 昌俊  横浜国立大学, 工学研究院, 教授 (90273383)
Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords細胞シート / 電気化学細胞脱離 / 血管内皮細胞
Research Abstract

我々は、電気化学的な反応により、細胞が素早くかつ非侵襲的に培養表面から脱離する現象を発見し、これを細胞組織の構築に応用してきた。この原理は、金-チオール結合を利用して金電極表面にアルカンチオール単分子層を形成し、これを介して接着させた細胞を、金-チオール結合を電気的に切断することで、脱離させるものである。これにより、細胞や細胞シートの5分以内の脱離が可能であることを示してきた。温度応答性培養皿では、1時間程度の脱離時間が必要であることを考えると、非常に素早い細胞脱離であるといえる。
前年度に設計・最適化した両性イオンペプチドを用いて、多孔質メンブラン上で厚みのある細胞シートを作製し、電気化学的に脱離させ回収した。さらにその細胞シートを積層化することで生存限界厚みに近い積層化細胞シートを作製できることを示した。また細胞シート内に血管内皮細胞をあらかじめ導入しておくことで、血管網を有する細胞シートを作製した。
またこの電気化学細胞脱離を直径200μmから700μmのニードルに適用することで、内表面が血管内皮細胞に覆われた血管様構造をハイドロゲル内に作製した。この電気化学的に転写された細胞は、その後の送液培養でも層構造を維持し、流れ方向に配向すること、ギャップジャンクションが維持されること、細胞極性が正常な方向に修正されること、タイトジャンクションによる血管バリア機能が発現することを示した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

血管構造の三次元配置を達成し、さらにヒトiPS細胞をハイドロゲル内に導入した培養系を新しく開始し、予備データがすでに得られている。この予備データを示して科研費新学術領域の公募班に申請したところ、採択され、さらに研究を発展させることが可能となった。

Strategy for Future Research Activity

今後は培養期間をさらに延長し、生体外の送液培養系でより複雑な組織が形成されることを示す。また、動物実験により、作製した組織が生体に生着できることを示す。

  • Research Products

    (16 results)

All 2014 2013 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results) Presentation (9 results) (of which Invited: 4 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results) (of which Overseas: 1 results)

  • [Journal Article] Rapid engineering of endothelial cell-lined vascular-like structures in in situ crosslinkable hydrogels2014

    • Author(s)
      T. Kageyama, T. Kakegawa, T. Osaki, J. Enomoto, T. Ito, T. Nittami and J. Fukuda
    • Journal Title

      Biofabrication

      Volume: 6 Pages: 025006

    • DOI

      doi:10.1088/1758-5082/6/2/025006

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Reverse transfection in microchamber arrays for cell migration assays2014

    • Author(s)
      J. Enomoto, R. Takagi, R. Onuki-Nagasaki, S. Fujita, and J. Fukuda
    • Journal Title

      Sensors & Actuators: B

      Volume: 190 Pages: 896-899

    • DOI

      doi: 10.1016/j.snb.2013.09.014

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Microfluidic microbial culture device for rapid determination of the minimum inhibitory concentration of antibiotics2013

    • Author(s)
      R. Takagi, J. Fukuda, K. Nagata, Y. Yawata, N. Nomura, and H. Suzuki
    • Journal Title

      Analyst

      Volume: 138 Pages: 1000-3

    • DOI

      doi: 10.1039/c2an36323b

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of super-dense transfected cell microarrays generated by piezoelectric inkjet printing2013

    • Author(s)
      S. Fujita, R. Onuki-Nagasaki, J. Fukuda, J. Enomoto, S. Yamaguchi, M. Miyake
    • Journal Title

      Lab on a Chip

      Volume: 13 Pages: 77-80

    • DOI

      doi: 10.1039/c2lc40709d

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cell-adhesive and cell-repulsive zwitterionic oligopeptides for micropatterning and rapid electrochemical detachment of cells2013

    • Author(s)
      T. Kakegawa, N. Mochizuki, N. Sadr, H. Suzuki, J. Fukuda
    • Journal Title

      Tissue Engineering

      Volume: 19 Pages: 290-8

    • DOI

      doi: 10.1089/ten.TEA.2011.0739

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Tissue Engineering Based on Electrochemical Desorption of an RGD-Containing Oligopeptide2013

    • Author(s)
      N. Mochizuki, T. Kakegawa, T. Osaki, N. Sadr, NN. Kachouie, H. Suzuki, J. Fukuda
    • Journal Title

      Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine

      Volume: 7 Pages: 236-43

    • DOI

      Doi: 10.1002/term.519

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Self-Assembled ligopeptides for Electrochemical Cell Detachment

    • Author(s)
      T. Kakegawa, A. Gautieri, F, Rigoldi, A. Manenti, J, Fukuda
    • Organizer
      2013 TERMIS-eu
    • Place of Presentation
      Istanbul, Turkey
  • [Presentation] Fabirication of perfusable vasculatures using micromolding and electrochemical cell transfer

    • Author(s)
      T.Osaki, J. Fukuda
    • Organizer
      IEEE EMBC2013
    • Place of Presentation
      Osaka Japan
  • [Presentation] In situ crosslinkable hydrogel for rapid engineering of vascular-like structures by using electrochemical detachment of cells

    • Author(s)
      T.Kageyama, T.kakegawa, T.Osaki, T.Ito, T.Nittami, J.Fukuda
    • Organizer
      MicroTAS2013
    • Place of Presentation
      Freiburg, GERMANY
  • [Presentation] Rapid assembly of perfusable microvascular-like structures by electrochemical cell transfer

    • Author(s)
      Tatsuya Osaki, Takahiro Kakegawa, Junji Fukuda
    • Organizer
      Termis-america
    • Place of Presentation
      Atlanta, USA
  • [Presentation] Microdevice for cell migration assays using reverse transfection

    • Author(s)
      J. Enomoto, R. Nagasaki, S. Fujita, J. Fukuda
    • Organizer
      MRS Fall Meeting & Exhibit 2013
    • Place of Presentation
      Boston, USA
  • [Presentation] 細胞培養マイクロデバイスの研究

    • Author(s)
      福田淳二
    • Organizer
      第65回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      広島国際会議場
    • Invited
  • [Presentation] 電気化学的手法を用いた再生医療技術

    • Author(s)
      福田淳二
    • Organizer
      電気化学会関東支部
    • Place of Presentation
      東京農工大
    • Invited
  • [Presentation] 血管構造を組み込んだ細胞組織作製のためのin situ架橋ハイドロゲルと電気化学細胞脱離

    • Author(s)
      福田淳二
    • Organizer
      日本MRS
    • Place of Presentation
      横浜開港記念会館
    • Invited
  • [Presentation] 立体組織構築のための 血管様構造の高速モールディング

    • Author(s)
      福田淳二
    • Organizer
      第12回日本再生医療学会総会
    • Place of Presentation
      京都国際会議場
    • Invited
  • [Patent(Industrial Property Rights)] Culture method and culture device2014

    • Inventor(s)
      J Fukuda et al.
    • Industrial Property Rights Holder
      University of Tsukuba
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      PCT/JP2014/054299
    • Filing Date
      2014-02-24
    • Overseas

URL: 

Published: 2015-05-28  

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